目的：应用快速蛋白液相色谱(fast protein liquid chromatography，FPLC)系统，建立分离和纯化热休克蛋白70-多肽复合物(heat shock protein 70-polypeptide complexes，HSP70-PCs)的方法，并观察其负载树突状细胞(dendritic cell，DC)的抗肿瘤免疫保护效应。 方法：采用DEAE-Sepharose离子交换层析和ADP-Agarose亲和层析，从热处理的BALB/c鼠源性结肠癌细胞(CT26)裂解液中分离、纯化HSP70-PCs。所得蛋白经不连续SDS-聚丙烯酰胺电泳及Western-blotting进行蛋白分子量及性质鉴定，Bradford法测定蛋白的得率。用提纯的HSP70-PCs负载BALB/c小鼠骨髓来源的DC，观察DC诱导的肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)对肿瘤细胞的杀伤活性；并将DC接种于荷瘤小鼠皮下，观察其对肿瘤生长的抑制作用及对荷瘤小鼠生存期的影响。 结果：纯化蛋白经鉴定为分子量70KD的HSP70-PCs；平均1克湿重肿瘤细胞获得63.63μg的HSP70-PCs；HSP70-PCs负载DC诱导的CTL对CT26肿瘤细胞具有特异性杀伤作用；用其进行治疗能明显抑制小鼠肿瘤的生长，并能显著延长荷瘤小鼠的生存时间。 结论：用上述层析法可分离出较高纯度的HSP70-PCs，将其负载DC后对结肠癌小鼠具有显著的治疗效果。
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