肠组织一氧化氮、一氧化氮合酶及肠细胞凋亡在新生大鼠坏死性小肠结肠炎肠损伤中动态变化

摘要

目的:建立新生SD大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型，动态观察新生大鼠NEC发病过程中肠细胞凋亡率和肠组织一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性变化及其与肠损伤关系，为阐明NEC发病机制、寻找有效治疗药物提供实验依据。 方法 :SD新生大鼠出生48小时开始给予鼠配方奶人工喂养，100％氮气缺氧90秒，4℃冷刺激10分钟，每天2次，连续3天，建立新生SD大鼠NEC模型。40只新生SD大鼠随机分成模型组(M)32只，对照组(C)8只。模型组开始缺氧冷刺激后24小时(M24)、48小时(M48)、72小时(造模结束，M72)及最后一次缺氧+冷刺激后24小时(M96)空腹分别断头处死8只，实验结束时处死对照组大鼠，留取肠管进行电镜观察及肠细胞凋亡率检测(流式细胞仪)。40只新生SD大鼠，按上述分组和实验方法，采用化学比色法检测肠组织NO含量和NOS活性。所有新生鼠均取回盲部近端肠管进行病理学检查及肠损伤评分。采用SPSS11.0统计学软件进行统计分析，α=0.05为显著性检验标准。 结果:[1]开始造模后，模型组相继出现腹泻、腹胀、萎靡、活动减少，生长减慢；透射电镜示肠黏膜出现大量凋亡细胞，有些形成凋亡小体。[2]对照组肠组织损伤评分和肠细胞凋亡率(％)分别为0.08±0.15、4.8±2.9；M24、M48、M72和M96肠组织损伤评分分别为1.38±0.42、1.46±0.69、1.58±0.30和3.33±0.59，肠组织细胞凋亡率分别为12.8±6.3、14.9±5.5、17.7±5.5和27.6±9.9。肠损伤程度与肠组织细胞凋亡率含量呈显著正相关(r凋亡率=0.853，p<0.01)。[3]M24、M48、M72、M96及对照组肠组织NO含量(mol／gprot)分别为0.94±0.44、2.07±0.38、2.88±0.32、3.09±0.40和3.98±1.15，肠组织tNOS活性(U/mgprot)为1.49±0.25、2.21±0.42、2.77±0.58、2.95±0.32和3.80±1.08，iNOS活性(U/mgprot)为0.55±0.23、1.25±0.27、1.94±0.46、2.06±0.18和2.86±1.07。肠组织NO、tNOS、iNOS含量与相应平均肠组织损伤程度均呈显著正相关关系(r分别为0.865、0.743、0.807，P均<0.05)。 结论:在鼠配方奶喂养+反复缺氧冷刺激后，肠细胞凋亡率明显增加，肠组织NO含量和tNOS活性，特别iNOS活性明显升高；随时间延长，肠细胞凋亡增加、肠组织iNOS表达上调及NO含量升高程度进一步加重。肠细胞凋亡可能是造成新生鼠NEC肠道进行性损伤病理基础，肠细胞非正常凋亡增加可增加肠上皮通透性，启动细菌移位和机体有害的炎症级联反应。NO在NEC肠屏障损伤发病机制中起重要作用，持续过度表达NO及其代谢产物介导黏膜损伤和肠屏障功能障碍，从而引发NEC发生。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩略词表

声明

第一部分：肠细胞凋亡在新生儿坏死性小肠结肠炎发病机制中作用的实验研究

第二部分：新生鼠坏死性小肠结肠炎肠组织一氧化氮、一氧化氮合酶变化及意义

结束语

致 谢

综述：新生儿坏死性小肠结肠炎防治进展

附录：攻读硕士学位期间发表的学述论文