金线莲中挥发油的提取及其抗肺癌细胞NCI-H446作用研究

摘要

研究目的：本文通过水蒸气蒸馏法提取珍稀药材金线莲中的挥发油，对金线莲中挥发油进行定性分析；研究金线莲中挥发油对肺癌细胞NCI-H446增殖活性影响，进一步探讨了金线莲中挥发油成分的抗肿瘤作用机制。
　　 研究方法：应用水蒸气蒸馏法、水浴回流提取法和索氏提取法提取金线莲中挥发油成分，以挥发油成分提取率为指标，考察三种不同提取方法对提取率的影响；应用气相色谱-质谱联用技术，对提取的金线莲中挥发油成分进行定性分析；
　　 应用MTT 检测法，检测金线莲中挥发油对人肺癌细胞NCI-H446的细胞毒作用，通过抑制率曲线计算金线莲中挥发油IC50；应用TUNEL 法、透射电镜法观察金线莲中挥发油对肿瘤细胞促凋亡形态学变化的影响；应用DNA-ladder 定性分析金线莲中挥发油对肿瘤细胞凋亡的影响。
　　 研究结果:水蒸气蒸馏法提取的挥发油成分，提取率为0.06％，高于其他两种方法。相比其他两种挥发油的提取方法，水蒸气蒸馏法还具有耗时短，有机溶剂用量少等优点。应用气相色谱-质谱联用技术对中药材金线莲中存在的挥发油成分进行定性分析，共可以检测出78个化合物，采用计算机对各峰质谱图进行NIST 标准质谱检索库检索及质谱裂解规律核对，共鉴定了37个化合物。采用面积归一化法计算了各个化合物的含量，占挥发油总量的96.26％。挥发油成分中以十六羧酸甲酯（47.98％）、棕榈酸（20.57％）为主。
　　 金线莲挥发油对肺癌细胞NCI-H446细胞有生长抑制作用，呈剂量和时间依赖性。作用24 h、48 h后对NCI-H446细胞的半数细胞抑制浓度IC50分别为122.85、70.17μg/mL。通过TUNEL 法、透射电镜法的检测与观察，可观察到金线莲中挥发油可以诱导肺癌细胞NCI-H446细胞凋亡。DNA 琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA-ladder 梯形条带。
　　 研究结论：金线莲中挥发油成分含量较高；水蒸气蒸馏法适合金线莲中挥发油提取，具有耗时短，有机溶剂用量少等优点；金线莲中挥发油成分能够抑制体外培养肿瘤细胞的生长，促进肿瘤细胞凋亡。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

前言

第一部分金线莲中挥发油的提取和分析

第二部分金线莲中挥发油成分抗肺癌细胞NCI-H446 作用研究

结论

参考文献

致谢

综述金线莲应用于肺癌的研究概况