尿毒症患者桡动脉组织学改变与Pit-1、BMP-2表达关系的研究

摘要

目的：
　　研究尿毒症患者桡动脉钙化的组织学特点、钙化发生情况及其与钠磷共转运体（Pit-1）和骨形态发生蛋白-2（BMP-2）的表达关系，并探讨影响血管钙化的相关因素。
　　方法：
　　45例尿毒症患者于动-静脉内瘘手术时，留取桡动脉0.5～1.0cm为尿毒症组；10例肾功能正常的患者行胃大部分切除手术时，留取胃左动脉0.5cm做对照组。HE、Masson染色观察桡动脉组织学及胶原蛋白表达改变；von Kossa染色方法观察动脉钙化程度。免疫组织化学的方法检测Pit-1和BMP-2在血管中的表达，同时测定血磷、钙、C-反应蛋白（CRP）、甲状旁腺激素（iPTH）、甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL），并和对照组进行比较。
　　结果：
　　1.无钙化的血管中，平滑肌细胞排列尚整齐，细胞间基质、胶原蛋白少，中膜未见明显异常，偶有内膜增厚。而多数钙化的血管中，中膜增厚，平滑肌细胞排列紊乱，细胞间基质明显增多，胶原蛋白明显增加，弹性纤维减少；内膜有均匀性增厚，基质中较多胶原蛋白，无钙质沉积。
　　2.45例尿毒症患者中，21例（46.67％）出现桡动脉钙化，主要发生在血管中膜，其中11(24.44%)例轻中度钙化，10例(22.22%)重度钙化，24例（53.33%）未见明显钙化。对照组均未见钙化。
　　3.免疫组化显示尿毒症组、对照组两者血管中膜均有Pit-1的表达，其中轻中度钙化组免疫阳性率为69.65%±10.52%、重度钙化组免疫阳性率为88.64%±8.07%，与无钙化组及对照组相比有显著差异（P<0.01）。同时钙化血管的BMP-2表达明显增加，轻中度钙化组为免疫阳性率为63.37%±11.64%、重度钙化组免疫阳性率为82.71%±3.53%，与无钙化组及对照组相比有显著差异(P<0.01)。另无钙化组中亦有12例表达BMP-2，对照组无表达。尿毒症无钙化组中Pit-1、BMP-2与对照组以及尿毒症轻中度钙化组与重度钙化组之间Pit-1、BMP-2的差异有统计学意义(P<0.05)。
　　4.统计结果表明，尿毒症患者血管钙化的发生与糖尿病史密切相关(P<0.05)，钙化程度与血磷、钙磷乘积以及CRP增高有明显的相关性(P<0.05)。尿毒症患者平滑肌层Pit-1、BMP-2的表达变化与血磷、钙磷乘积以及CRP水平密切相关(P<0.01)以及Pit-1、BMP-2二者间密切相关（P<0.01）。
　　结论：
　　1.尿毒症患者桡动脉钙化发生远高于一般人群，主要发生在血管中膜，与血磷、钙磷乘积、CRP及糖尿病病史有关。
　　2.尿毒症环境下平滑肌细胞Pit-1表达增加，介导磷的转运，与血管钙化程度密切相关，参与了血管钙化的发生、发展。
　　3.尿毒症患者桡动脉钙化与BMP-2表达有关，桡动脉钙化前已有BMP-2的表达，表明BMP-2可能是血管钙化的早期生物学标志之一。
　　4.尿毒症病理状态下，血管平滑肌细胞失去了原有的组织学特点，具有类似成骨样细胞的生物学功能，细胞介导的主动过程可能参与了血管的钙化。

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前言

材料与方法

一.材料

1.研究对象及分组

2.标本收集

3.仪器和试剂

二.研究方法

1.HE染色

2 . M asson染色

3.von Kossa染色

三.结果分析

1.钙盐沉积状况

2.免疫组化

四.统计学方法

实验结果

一.临床与生化指标

二.正常对照和尿毒症患者桡动脉的组织学形态特点

1.HE染色

2 . M asson染色

三.尿毒症患者桡动脉钙化的特点

1.von Kossa染色

2.钙化与临床指标的相关性

四.尿毒症患者桡动脉Pit-1和BMP-2的表达变化

1.Pit-1与钙化的相关性

2.BMP-2与钙化的相关性

讨论

全文结论

参考文献

致谢

慢性肾脏病血管钙化的诊治进展