红细胞生成素对慢性肾衰竭大鼠内皮祖细胞归巢相关因子表达和肾脏修复的影响

摘要

目的:研究促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）对慢性肾衰竭大鼠（chronic renal failure,CRF）内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）归巢至残肾组织参与损伤修复的影响。
　　方法:建立分阶段5/6肾切除慢性肾衰竭大鼠模型。实验动物随机分3组：假手术组（Control），慢性肾衰竭组（模型组），rHuEPO干预组（治疗组）；造模后应用rHuEPO干预6周，8周后处死所有大鼠，处死前留取血尿标本送我院检验科检测Scr、BUN、尿蛋白、Hb、HCT指标；处死时心脏采血并留取残肾组织标本，采用密度梯度离心法分离培养大鼠外周血内皮祖细胞；HE染色观测肾组织病理改变；免疫组化检测肾小管毛细血管 CD31、VEGF及 EPO/EPOR、SDF-1/CXCR4、SCF/C-Kit、Angiopoietin-1/Tie2表达水平；Western blot及real-time PCR检测残肾组织各归巢因子蛋白和mRNA表达。
　　结果:相比CRF模型组，应用rHuEPO治疗后显著上调CRF模型大鼠残肾组织CD31、VEGF表达，改善了损伤肾组织血管密度，促进了血管新生（P＜0.05）；上调残肾组织EPO/EPOR、归巢因子（SDF-1/CXCR4、SCF/C-Kit、Angiopoietin-1/Tie2）及其受体mRNA及蛋白的表达（P＜0.05），促进EPCs归巢至残肾参与损伤修复；外周血EPCs动员显著上调（P＜0.05）；血肌酐、尿蛋白及尿素氮水平明显降低（P＜0.05），Hb、HCT明显升高（P＜0.05），改善肾小球、肾小管周毛细血管内皮细胞功能，并减轻肾脏病理损害。
　　结论:促红细胞生成素可能通过激活残肾组织归巢及相关因子的表达，促进EPCs动员并向残肾归巢，参与血管新生，从而改善肾功能、修复慢性肾损伤。

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前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

1. EPO对CRF大鼠外周血EPCs的影响

2. EPO对CRF大鼠血生化、肾功能影响

3.EPO对CRF大鼠肾组织病理改变的影响

4．免疫组化法结果

5. Rt Real-time PCR检测CRF大鼠肾组织EPCs归巢相关因子mRNA表达

6. Western blot检测CRF大鼠肾组织EPCs归巢相关因子蛋白表达

讨论

1. 慢性肾衰竭(CRF)模型建立

2. 促红细胞生成素（EPO）促进CRF损伤修复

3.EPO促进CRF大鼠EPCs动员并归巢至残肾

4. EPCs归巢后参与新生血管

结论

参考文献

致谢

内皮祖细胞与慢性肾脏病的研究进展

参考文献