福建汉族人群葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因突变类型研究

摘要

目的：对福建地区汉族人群进行葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）基因突变频率进行研究，丰富G6PD缺乏症基因突变的资料及提高分子诊断水平，并丰富中国G6PD基因突变地域性的研究。
　　方法：⑴应用运用改良G6PD测定试剂盒（定量比值法）检测G6PD酶活性异常样本240例及G6PD酶活性正常样本240例作为阴性对照，提取上述480例样本基因组DNA。⑵采用阻滞突变系统-聚合酶链式反应（The amplification refractory mutation system，ARMS-PCR）方法扩增G6PD酶活性异常的240例基因组DNA，结合琼脂糖凝胶电泳分析判定G6PD基因组DNA G1388A、G1376T、A95G三个中国人常见突变位点的突变情况。⑶应用聚合酶链反应（PCR）加上基因测序的方法测定阳性组当中酶活性异常而未检出上述三个突变位点的标本及240例阴性样本，进一步分析G6PD缺乏症中其他可能的突变位点。⑷对召回的240患儿家长进行问询预防情况。
　　结果：①应用ARMS-PCR结合琼脂糖凝胶电泳分析得出结果：G1376T突变118例，占49.2％;G1388A突变48例，占20%;A95G突变20例，占8.3%。②应用聚合酶链反应（PCR）加上基因测序的方法测定阳性组当中酶活性异常而未检出上述三个突变位点的标本及240例阴性样本，得出结果：C1024T突变18例，占7.5%;G392T突变16例，占6.7%;C1360T突变3例，占1.25%；G487A突变3例，占1.25%；T1365-13C突变3例，占1.25%；T517C突变2例，占0.83%；C1311T、T1365-13C复合G871A突变4例，占1.67%；C1311T复合T1365-13C突变2例，占0.83%；C1311T、T1365-13C复合G392T2例，占0.83%；C1024T复合T1365-13C突变1例，占0.42%。240例阴性样本中检测出1例C1311T这一同义突变，其余239男童外显子及侧翼内含子区域均无突变。③召回的240名G6PD缺乏症患者的父母均表示早期准确诊断G6PD缺乏症对他们预防意外发生有很重要的指导意义，240名患者均未出现溶血等意外。
　　结论：⑴研究发现福建地区三种中国人常见的G6PD基因突变类型所占比例，与中国其它不同地域、不同民族G6PD缺乏症高发区之间吻合；⑵G6PD酶活性异常与基因突变型之间存在差异；⑶发现1例正常人群存在C1311T同义突变；⑷丰富了福建地区G6PD缺乏症的诊断方法。

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中文摘要

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前言

一 实验仪器及试剂

二 实验对象及方法

三、实验结果

四 讨论

五 小结

六 结论

参考文献

综述

致谢