不同前列腺癌细胞株Talin-1表达情况和侵袭能力关系研究

摘要

第一部分不同前列腺癌细胞株之间Talin-1表达情况和侵袭能力关系
　　目的：通过体外培养不同来源人前列腺癌细胞株（DU-145、PC-3、LNCaP）及人正常前列腺细胞株，检测 Talin-1在各细胞株中的表达差异及各细胞株侵袭和迁移能力，探讨Talin-1与不同来源人前列腺癌细胞侵袭及迁移的关系。
　　方法：体外培养人前列腺癌细胞株（DU-145、PC-3、LNCaP细胞株）及人正常前列腺细胞株，传代培养至对数生长期，利用RT-PCR技术检测各细胞株中Tali n-1的mRNA表达水平，Western-blot技术检测各细胞株中Talin-1的蛋白表达水平，Transwell侵袭和迁移实验及细胞划痕实验检测各细胞株侵袭及迁移能力，M TT法检测各细胞株增殖能力。
　　结果：与正常人前列腺细胞株相比，在前列腺癌LNCaP细胞株、PC-3细胞株、DU145细胞株中的Talin-1mRNA、蛋白表达水平有差异（P<0.05）；其中DU-145、PC-3、LNCaP细胞株中的Talin-1mRNA以及蛋白表达水平依次递减，组间比较均有统计学差异（P<0.05）。与正常人前列腺细胞株相比，在 LNCaP细胞株、PC-3细胞株、DU145细胞株的侵袭和迁移能力明显增高（P<0.05），其中DU-145、PC-3、LNCaP细胞株中的迁移、增殖以及侵袭能力依次递减，组间比较均有统计学差异（P<0.05）。
　　结论：1、不同来源的人前列腺癌细胞的侵袭和迁移能力不同；2、不同来源的人前列腺癌细胞株中的Talin-1的表达水平不同；3、Talin-1与前列腺癌的侵袭和迁移能力相关；4、低表达Talin-1的前列腺癌的侵袭和迁移能力低，恶性度低，高表达Talin-1的前列腺癌的侵袭和迁移强，恶性度高；5、Talin-1可作为前列腺癌恶性度的预测指标之一。
　　第二部分沉默Talin-1基因对前列腺癌PC-3细胞株表达和侵袭能力的影响
　　目的：针对前列腺癌PC-3细胞中异常表达的Talin-1基因进行沉默，探讨沉默T alin-1基因后前列腺癌细胞株的侵袭及迁移能力变化，探讨Talin-1作为靶基因进行特异性干扰的可行性。
　　方法：利用RNAi方法，以Talin-1基因为治疗靶点针对前列腺癌PC-3细胞中的Talin-1基因进行基因沉默，同时选取PC-3空白对照组，基因沉默组、基因沉默后加入转化生长因子(TGF-β)组，PC-3加入TGF-β组，利用Western-blot技术检测各细胞株中E-cadherin以及Vimentin的蛋白表达水平，Transwell侵袭和迁移实验及细胞划痕实验检测各细胞株侵袭及迁移能力，MTT法检测各细胞株增殖能力。
　　结果：基因沉默后，PC-3+TGF-β、PC-3、PC-3+TGF-β+RNAi、PC-3+RNAi4组中 E-cadherin蛋白表达水平依次递增，Vimentin蛋白表达水平依次递减以及侵袭、增殖和迁移能力依次递减，4组间两两比较差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：沉默Talin-1基因后前列腺癌PC-3细胞系的增长速度减慢，肿瘤的侵袭和迁移能力下降，其可能机制是通过升高 E-cadherin蛋白表达以及降低 Vimentin蛋白表达从而诱发EMT表型转化而实现的，本试验可能为后续的以Talin-1为靶点的前列腺癌基因治疗体内实验提供理论依据。

目录

封面

声明

目录

英文缩写词表

中文摘要

英文摘要

前言

参考文献

第一部分不同前列腺癌细胞株之间Talin-1表达情况和侵袭能力关系

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

第二部分 沉默Talin-1基因对前列腺癌PC-3细胞株表达和侵袭能力的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献：

小结

综述: Talin在肿瘤中的作用

致谢