mTOR 抑制剂雷帕霉素对伯基特淋巴瘤细胞增殖抑制的研究

摘要

目的：探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂雷帕霉素对伯基特淋巴瘤细胞株 RAJI细胞和 CA46细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及其作用机制，为临床靶向治疗伯基特淋巴瘤提供实验依据。 方法：采用MTT法观察雷帕霉素对RAJI细胞和CA46细胞增殖抑制作用，流式细胞术PI单染分析雷帕霉素对RAJI细胞和CA46细胞周期分布的影响,流式细胞术Annexin V-FITC双染分析雷帕霉素对RAJI细胞和CA46细胞凋亡的影响,Western blot法检测雷帕霉素对RAJI细胞和CA46细胞RPS6、p-RPS6、survivin和caspase-3蛋白表达水平的影响。 结果： (1)雷帕霉素能够明显抑制RAJI细胞和CA46细胞的增殖，在雷帕霉素为1nmol/L时，细胞增殖抑制率即达到20%，表现出良好的生物活性，且抑制作用具有时间依赖性和浓度依赖性； (2)不同浓度雷帕霉素分别作用于RAJI细胞和CA46细胞24h、48h后，和对照组相比，细胞周期发现处于G1/G0期细胞逐渐增多，S期和G2/M期细胞则逐渐减少，呈现时间依赖性和浓度依赖性； (3)100nmol/L雷帕霉素作用于RAJI细胞和CA46细胞48h后，Annexin V-PI双染流式细胞术检测可见明显凋亡，且主要为中晚期凋亡； (4)Western blot法检测雷帕霉素作用于RAJI细胞和CA46细胞后，RPS6表达水平无明显变化，p-RPS6和survivin表达水平明显降低，caspase-3表达水平明显升高，且具有时间依赖性和浓度依赖性。 结论：雷帕霉素能够通过抑制mTOR下游通路RPS6蛋白的磷酸化表达，进而抑制mTOR/RPS6通路活化，阻滞细胞周期于G1/G0期，达到有效抑制伯基特淋巴瘤细胞株RAJI细胞和CA46细胞增殖，同时下调抗凋亡蛋白survivin的表达，激活内源性促凋亡蛋白caspase-3而诱导细胞发生凋亡。因此，mTOR抑制剂雷帕霉素可作为伯基特淋巴瘤靶向治疗的研究目标。

目录

封面

声明

目录

英文缩写词表

中文摘要

英文摘要

前言

参考文献

材料和方法

1.材料和试剂

2.实验方法

3．统计学分析

结果

1．MTT实验检测细胞增殖抑制率

2.细胞周期检测

3．细胞凋亡测定

4．蛋白质免疫印迹

讨论

结论

参考文献

综述: 伯基特淋巴瘤的靶向治疗进展

致谢