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蜂毒肽与黄芩配伍对MRSA抑制作用的研究

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摘要

1文献综述

1.1前言

1.2研究综述

1.2.1蜂毒肽的研究进展

1.2.2耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA)研究进展

1.2.3黄芩的研究进展

1.3本试验研究的意义

2.试验部分

2.1蜂毒肽的分离纯化与鉴定

2.1.1试验材料

2.1.2试验方法和步骤

2.1.3结果与分析

2.2中药的提取与选择

2.2.1试验材料

2.2.2试验方法和步骤

2.2.3结果与分析

2.3体外抑菌试验

2.3.1 试验材料

2.3.2试验方法和步骤

2.3.3结果与分析

2.4体内抑菌实验

2.4.1材料

2.4.2试验方法和步骤

2.4.3结果与分析

3结果分析与讨论

3.1结果分析

3.2讨论

4结论

参考文献

致谢

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摘要

本文将蜂毒肽与黄芩提取物配伍对MRSA抑制作用的研究。对取自福建农林大学教学蜂场的意大利蜜蜂蜂毒,经过葡聚糖凝胶层析分离纯化得到melittin,并经SDS-PAGE电泳、HPLC分析鉴定,获得电泳级纯的蜂毒肽。所获得的金黄色葡萄球菌对16种抗生素中的9种均产生耐药,仅对万古霉素高度敏感(抑菌圈直径为23 mm),判定所获得金黄色葡萄球菌为耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌。通过对13种相关中药提取物对MRSA活性抑制的筛选,黄芩醇提物在13种中药中抑制MRSA的能力最强,其抑菌圈直径为22 mm,并利用倍比稀释法测定黄芩醇提物对MRSA的MIC为3.1 mg/ml。为此,选择黄芩醇提物作为与纯蜂毒肽配伍的中药。对MRSA抑制作用的试验研究,结果如下: 蜂毒肽与黄芩醇提物体外抑菌试验显示,二者配伍对MRSA的抑菌圈直径最大为38 mm,最小抑菌圈直径为25 mm,而万古霉素对MRSA的抑菌圈直径仅为23 mm,因此可看到二者配伍所产生的抑菌效果均高于万古霉素;体内抑菌试验中,通过急性攻毒实验测出106个/ml浓度的菌液为正式感染攻毒标准,对小鼠腹腔注射各种浓度配伍的蜂毒肽与黄芩提取物测定小鼠存活率,以及对小鼠肝脏、脾脏和胸腺免疫器官重量的影响。结果显示D组(中等剂量的蜂毒肽和高剂量黄芩提取物)小鼠肝脏均数为65.24±6.58 mg/g,万古霉素组59.11±6.12mg/g,二者差异显著。D组对小鼠脾脏和胸腺重量的均数8.29±1.25 mg/g、2.87±0.61 mg/g,万古霉素组为6.30±1.36 mg/g和2.03±0.59 mg/g。二者差异极显著。D组提高小鼠的存活数量,可以达到13只,存活率为86.7%。万古霉素组小鼠肝脏均数为的存活率仅有66.7%。说明蜂毒肽与黄芩提取物配伍对MRSA引起的感染具有很好的治疗效果。

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