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灵芝原生质体单核化杂交育种

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引言

第一章文献综述

第一节灵芝概述

1.1灵芝的历史文化

1.2灵芝的功效研究现状

1.3灵芝育种研究现状

第二节拮抗反应与品种鉴别

第三节交配型因子在食用菌育种中的应用

第四节 食用菌育种方法

4.1自然选育

4.2诱变育种

4.3杂交育种

4.4细胞融合育种

4.5现代生物技术在育种上的应用和改良

第五节DNA分子标记在杂交菌株鉴定中的应用

5.1 DNA分子标记的种类

5.2 DNA分子标记在食用菌杂交菌株鉴定中的作用

第六节灵芝研究的发展方向展望

第二章亲本的选择以及原生质体的制备

第一节亲本的选择

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第二节原生质体的制备与再生

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第三章灵芝交配型因子测定

第一节单核菌株的获得与交配型测定

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第二节不同菌株间交配型因子的测定

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

第四章灵芝杂交及杂交菌株的验证

第一节灵芝杂交及纯化

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

第二节杂交菌株的常规方法验证

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

第三节杂交菌株的分子标记验证

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

第五章杂交菌株生物学特性

第一节温度对灵芝菌丝生长速度的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第二节pH梯度对灵芝菌丝生长速度的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第三节灵芝栽培料菌丝生长速度比较

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第六章杂交菌株农艺性状测定

第一节出菇实验

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

第二节多糖含量分析

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

结论

参考文献

致 谢

附表

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摘要

本研究利用原生质体单核化技术,成功获得了灵芝的杂交菌株,经过出菇实验和农艺性状测定获得了具有杂交优势的灵芝菌株。本研究得出以下几个结论: 1、本研究利用生物统计学和分子生物学方法,根据遗传距离较远和农艺性状互补的原则选择亲本,最后确定GL0006、GL0012、GL0024、GL0030+2和GL0003+1作为杂交实验的亲本菌株。 2、在原生质的再生实验过程中,发现不同交配型的单核菌株的萌发情况不同,而且萌发时间存在明显的先后顺序,一种交配型集中在前期,另一种则集中在后期。不同交配型的单核菌株在菌丝形态上也有差异。 3、本研究通过原生质体单核化获得了81株灵芝单核菌株,对单核菌株进行了交配型测定,获得了7种不同交配型的单核菌株。以此为材料进行杂交育种,获得了24株杂交菌株。 4、利用多种方法对杂交菌株进行了验证,确定获得杂交菌株不同与亲本。包括以下几个方面:对影响杂交菌株的菌丝生长的温度、pH值等因素进行了初步研究,并做了杂交菌株与亲本的拮抗反应、栽培料菌丝生长速度,发现杂交菌株30+2-7×24-7在30℃下菌丝生长速度最快达到0.9380 cm/d,杂交菌株06-6×30+2-7在栽培料中的生长速度最快达到0.460 cm/d,显示出杂交菌株与亲本之间的存在显著差异。 5、利用分子生物学的方法进行杂交菌株鉴定,发现杂交菌株的遗传物质来源于两个亲本。 6、测试了菌丝多糖,发酵液多糖,子实体多糖含量以及灵芝产量,并对数据进行了分析,发现杂交菌株30+2-7×24-7在多糖和产量方面与亲本和其他杂交菌株都存在显著的杂交优势。 7、实验结果发现杂交菌株产量和菌丝生长速度没有相关关系,还发现杂交菌株的优良性状与亲本的遗传距离也没有正相关性。

著录项

  • 作者

    刘方;

  • 作者单位

    福建农林大学;

  • 授予单位 福建农林大学;
  • 学科 微生物
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 吴小平,谢宝贵;
  • 年度 2009
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 S567.310.351;
  • 关键词

    灵芝; 单核化; 交配型; 杂交育种;

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