高脱氢表雄酮山药种质资源及其抗肿瘤和抗氧化的研究

摘要

山药是一种食药兼用的作物。据报道,山药中的类激素--脱氢表雄酮(DHEA),具有抗衰老、抗致癌、抗肥胖症、抗糖尿病等功效。本研究收集河南、福建、山西、江西等地的41个山药品种,研究结果如下:
　　 1、DHEA检测条件和山药DHEA提取工艺的优化高效液相色谱法检测DHEA的最佳条件:波长215nm,流动相为甲醇:水=75∶25,柱温30℃,流速0.8 ml/min。以“FG-1”为材料,进行单因素和正交试验,确定最佳提取工艺为:以水为发酵溶剂,料液比1∶20,60℃水浴48h,加入2％发酵液体积的浓硫酸,90℃水浴24h,以20％的NaOH中和并烘干后,石油醚索氏提取24h,浓缩定容。在此工艺下提取并测得“FG-1”中DHEA含量为5.73mg/100g。
　　 2、高DHEA山药种质资源的研究
　　 筛选出块根中DHEA含量最高的品种是“WK-3”(8.15mg/100g),是河南推广品种“铁棍2号”(对照)的2.21倍;块根皮中DHEA含量最高的品种为“FG-1”(25.63mg/100g),是“铁棍2号”(对照)的2.03倍;山药豆(学名:零余子,地上部的繁殖器官,占块根产量的5％-10％)中DHEA含量最高的品种为“CT山药”,达7.57mg/100g,比其块根(4.37mg/100g)高73.23％。
　　 3、山药DHEA提取物的体内抗肿瘤试验
　　 构建小鼠S180荷瘤模型,取DHEA标准品和“WK-3”(河南)、“CT山药”(福建)、“江西山薯”三种高DHEA山药进行抗肿瘤研究。以2.08mg/kg·d剂量条件灌胃,“WK-3”试验组DHEA提取物的抑瘤率最高,达34.72％(抗肿瘤药物环磷酰胺为49.28％)。各试验组均能极显著地提高肿瘤小鼠的胸腺指数和脾指数,“WK-3”组的提高幅度最大的,其胸腺指数为3.44 mg/g,比对照组(2.33 mg/g)高47.64％;脾指数为10.58mg/g,比对照组(8.23mg/g)高28.55％。同时,各试验组的抗肿瘤效果均呈剂量效应关系。4、山药DHEA提取物的体内抗氧化试验以黑腹果蝇为对象,“WK-3”试验组(DHEA提取物浓度为0.005％,100mL培养基需从61.35g山药中提取DHEA)的寿命延长效果最好:雄果蝇平均寿命(62.17d)比对照组延长14.42％,平均最高寿命(73.67d)延长17.55％;雌果蝇的平均寿命(65.33d)比对照组延长16.46％,平均最高寿命(76.63d)延长20.36％。
　　 “WK-3”(DHEA浓度为0.005％)组对果蝇超氧化物歧化酶(SOD)含量和总抗氧化能力(T-AOC)提高幅度最大:雄果蝇SOD(4.27U/mg)比对照组提高11.58％,T-AOC(0.56单位/毫克蛋白)提高30.23％;雌果蝇SOD(3.89U/mg)比对照组提高15.67％,T-AOC(0.51单位/毫克蛋白)提高36.94％。“CT山药”(浓度0.005％)组对雄果蝇丙二醛(MDA)含量的降低幅度最大,达19.31％,“WK-3”(浓度0.005％)组对雌果蝇MDA含量的降低幅度最大,达18.11％。