仔猪先天性震颤的流行病学调查及病原学初步研究

摘要

仔猪先天性震颤(Congenital tremors of piglet,CT),俗称“仔猪抖抖病”,是指刚出生仔猪由于脊髓水平以上的中枢神经系统髓鞘形成阻滞,出现的局部或全身肌肉阵发性挛缩的一种疾病。该病无有效的治疗措施,大部分发病仔猪以死亡转归或淘汰处理,给养猪生产造成较大的经济损失。其病因可能包括营养因素、遗传因素及病毒性感染等,其中,多数学者认为主要病因是病毒感染。
　　 为了掌握仔猪先天性震颤的流行病学特点,并进一步探讨传染性因素与仔猪先天性震颤的发病关系,本研究对2008年2月～2010年12月龙岩市21个发生仔猪先天性震颤的规模化猪场进行发病情况的调查,并应用ELISA、PCR、病毒分离、动物接种试验等方法调查了目前认为与仔猪先天性震颤有关的猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪伪狂犬病毒(PRv)、猪细小病毒(PPV)等病原的血清学及病原学情况,结果显示:
　　 1.仔猪先天性震颤一年四季均可发病,表现为阶段性和零星发生,发病率为1.4％～35.0％。经产母猪和初产母猪所生的仔猪均可发病,经产母猪的仔猪比较常见。新生仔猪发病的母猪仅为经产母猪的猪场占调查猪场的71.4％(15／21)。仔猪先天性震颤的发生与母猪猪瘟、猪伪狂犬疫苗的免疫方式和疫苗的种类无关。发病仔猪的病理变化以淋巴结呈暗褐色、周边出血及肾皮质出血为主要特征。新生仔猪发病后无有效的治疗措施,只能采取辅助治疗。
　　 2.应用ELISA方法检测了19个发病场母猪218份血清的CSFV、PCV-2、PRV—gE和PPV抗体,结果显示:①发病猪场的猪瘟疫苗总体免疫效果较差,免疫不合格场占52.6％(10／19),新生仔猪发病的母猪的猪瘟抗体合格率54.0％(34／63)明显低于新生仔猪正常的母猪的猪瘟抗体合格率78.1％(121／155)；②发病猪场PR野毒阳性率为42.1％(8／19)。在PR野毒阳性场中,新生仔猪正常的母猪和新生仔猪发病的母猪的PRV野毒阳性率分别为50.0％(28／56)和57.8％(22／38)；③发病猪场均有发生PCV-2感染,其母猪的PCV-2血清学阳性率在75.0％～100.0％之间,与正常猪场的母猪PCV-2阳性率(94.0％以上)差别不明显；④发病猪场母猪PPV感染率为11.1％～62.5％。
　　 3.应用PCR方法对11例患病仔猪的病料组织进行CSFV、PCV-2和PPV的病原检测,结果CSFV阳性率为81.8％,PCV-2阳性率为87.5％,PPV阳性率为37.5％。其中CSFV、PCV-2和PPV混合感染率为25.0％,CSFV和PCV-2混合感染率为50.096,CSFV和PPV混合感染率为12.5％。
　　 4.序列分析结果显示:本研究获得的7株CSFV的E2基因之间核苷酸序列差异很小,同源性为99.0％～100％,与Alfort株(登录号X87939)同源性为95.1％～96.2％,与猪瘟兔化弱毒株(HCLV)(登录号AF091507)和石门株(Shimen)(登录号AF092448)的同源性为83.3％～84.7％。本研究获得的5株PCV2 Cap基因之间核苷酸序列差异很小,分离的同源性为98.9％～100％,与Genbank发布的标准序列(登录号AF166528.1)的同源性为98.7％～99.4％；本研究获得的3株PPV VP2基因之间核苷酸序列差异也很小,同源性为99.4％～99.6％,与Genbank发布的标准序列(登录号HM355807.1)的同源性为99.0％～99.8％。
　　 5.病毒分离鉴定结果显示:经PCR检测为阳性的4个病例分别接种PK-15细胞后,2例出现细胞病变(CPE)。细胞培养物经PCR鉴定,1例为CSFV、PCV-2和PPV阳性,2例为CSFV、PCV-2阳性,另1例CSFV、PPV阳性。
　　 6.PRV动物接种试验结果显示:11个病例的病料组织悬液和2例出现CPE的细胞培养物接种家兔,家兔表现正常,PRV试验阴性。
　　 7.防制效果:对15个发病猪场,采取全场母猪紧急免疫猪瘟疫苗后,能有效控制仔猪先天性震颤的发生。
　　 本研究结果表明仔猪先天性震颤的发病率并不高,表现为阶段性发病和零星发病,经产母猪仔猪多发。仔猪先天性震颤的发病与母猪猪瘟、猪伪狂犬疫苗的免疫方式和疫苗的种类无关。病理割检以淋巴结呈暗褐色、周边出血及肾皮质出血为主要特征。仔猪先天性震颤的发生与其PPV、PCV-2、PRV的感染没有明显的相关性,但可能与母猪感染CSFV有很大的关系,特别是母猪同时感染了CSFV与PCV-2。笔者推测,在仔猪先天性震颤的发病过程中,PCV-2起了重要的协同作用,但是需要动物回归试验,复制出仔猪先天性震颤的病例才能确诊。

目录

文摘

英文文摘

第一篇文献综述

1 仔猪先天性震颤病的概述

1.1 流行特点

1.2 临床症状

1.3 病理变化

1.4 诊断

1.5 防制

2 仔猪先天性震颤的病因研究概况

2.1 病毒因素

2.2 遗传缺陷因素

2.3 毒素因素

2.4 营养素缺乏因素

3 本研究的目的和意义

第二篇研究内容

试验一 仔猪先天性震颤的发病情况与血清学调查

1 发病情况调查

2 血清学调查

试验二 仔猪先天性震颤的病原检测

1 材料

2 方法

3 结果

试验三 仔猪先天性震颤的病毒分离鉴定

1 材料

2 方法

3 结果

第三篇讨论

1 仔猪先天性震颤的发病特点

2 CSFV、PCV-2和PPV的PCR检测与序列分析

3 CSFV、PCV-2、PRV和PPV培养特性及鉴定

4 仔猪先天性震颤的病因初步讨论

第四篇结论

第五篇有待进一步研究的问题

参考文献

附录1 :仔猪先天性震颤的发病情况调查

附录2 :仔猪先天性震颤的外观与病理变化图

致谢

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