双氢青蒿素哌喹片含量测定研究与伤湿祛痛膏中乌头碱的检查研究

摘要

双氢青蒿素哌喹片为青蒿素第二代抗疟疾药，是治疗疟疾，尤其是多重抗药性恶性疟疾的首选药物。其两个有效成分分别为：双氢青蒿素(Dihydroartemisinin，DHA)和磷酸哌喹(Piperaquine phosphate，POP)。我国现行国家药品质量标准中，DHA的含量测定方法为：用硅胶柱分离洗脱后，挥干溶剂，收集残渣，经碱水解产生有紫外吸收的物质，紫外分光光度法测定。该操作步骤多，引入误差的机会多。本课题旨在建立专属性强、准确、简便的定量分析方法，采用HPLC-UV法直接测定双氢青蒿素哌喹片中的DHA。我国现行国家药品质量标准中，采用紫外分光光度法(Ultraviolet Specterphotometry，UV)测定双氢青蒿素哌喹片中磷酸哌喹的含量。由于复方制剂中干扰因素多，不经分离直接采用紫外分光光度法测定磷酸哌喹的含量误差较大。 本课题旨在建立专属性强、准确、简便的定量分析方法，采用HPLC-UV法测定双氢青蒿素哌喹片中的PQP。 伤湿祛痛膏是由川乌、草乌等药材制成的复方橡皮膏剂，主要用于头痛、风湿痛、神经痛等。因为川乌、草乌中均含有剧毒的乌头碱类酯型生物碱，而伤湿祛痛膏的我国现行国家药品质量标准中，并未对乌头碱进行限量控制。所以，为完善伤湿祛痛膏的质量标准，更好地控制产品质量，本课题采用薄层色谱法(Thin Layer Chromatography，TLC)对伤湿祛痛膏中乌头碱的限量检查进行研究，该检查方法简便、结果准确。 方法： 双氢青蒿素的含量测定采用HPLC法，用外标法以α和β体峰面积之和对DHA进行定量分析。理论板数按α异构体峰或β异构体峰计算均不低于10000。 液相色谱条件(DHA)色谱柱：Phenomenex C18柱(250 mm×4.6mm，5μm)；乙腈-甲醇-0.02 mol·L<'-1>硫酸铵(50:10:40，稀硫酸调节至pH 4.8)；流速：1.0 mL·min<'-1>；检测波长：210nm；柱温：30℃；进样量：10μL。 磷酸哌喹的含量测定采用HPLC法，用外标法以峰面积对PQP进行定量计算。理论板数以磷酸哌喹峰计不低于2000。 液相色谱条件(PQP)色谱柱：Phenomenex C18(250 mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.022 mol·L<'-1>盐酸(30:70，三乙胺调节至pH 2.3)；流速：1.0 mL.min<'-1>；检测波长：225 nm；柱温：30℃；进样量：10μL。 乌头碱的限量检查采用TLC对照品比较法，实现良好分离，重现性好。 薄层色谱条件展开剂：正己烷-乙酸乙酯-无水乙醇(6.4:3.6:1)；显色剂：稀碘化铋钾试液。 结果： 双氢青蒿素的含量测定方法精密度好，DHA的RSD为0.49％(n=5)；准确度高，回收率为98.6％；双氢青蒿素在0.84～25.12μg的范围内，峰面积与浓度间呈现良好的线性，线性方程为A=29987C+1006.6，γ=0.9999(n=7)；信噪比S/N=10时，双氢青蒿素的最低定量限为80 ng；供试品溶液在分析浓度下，8小时内基本稳定。 磷酸哌喹的含量测定方法精密度好，PQP的RSD为0.57％(n=6)；准确度高，回收率为101.3％；磷酸哌喹在0.20～1.21μg的范围内，峰面积与浓度间呈现良好的线性，线性方程为A=525092C+36071，γ=0.9998(n=5)；信噪比S/N=10时，磷酸哌喹的最低定量限为90 ng，供试品溶液在分析浓度下，8小时内基本稳定。 乌头碱的限量检查乌头碱的分离效果良好，斑点清晰圆整、无拖尾现象；以稀碘化铋钾试液作显色剂，显色稳定，利于乌头碱斑点的检出和判定。

目录

论文说明：英汉缩略语对照

声明

摘要

前言

第一部分HPLC法测定双氢青蒿素哌喹片中双氢青蒿素含量的研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

5结论

参考文献

第二部分HPLC法测定双氢青蒿素哌喹片中磷酸哌喹含量的研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

5结论

参考文献

第三部分TLC法检查伤湿祛痛膏中乌头碱限量的研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

5结论

参考文献

全文总结

文献综述

致谢

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