炎症对人肾系膜细胞增殖的影响及曲格列酮的干预机制探讨

摘要

目的：观察曲格列酮对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人肾小球系膜细胞(HMCL)增殖及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA和蛋白表达的影响，探讨曲格列酮在炎症诱导的系膜细胞中的作用及其可能机制，为临床治疗提供药理学靶点和理论依据。 方法：将培养的HMCL分为空白对照组，不同浓度HNF-α诱导组，不同浓度曲格列酮干预组，曲格列酮对照组。采用噻唑蓝比色法(MTT)检测各组系膜细胞增殖水平，逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法检测各组系膜细胞ICAM-1mRNA的表达水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组系膜细胞培养上清中ICAM-1蛋白表达水平，免疫细胞化学(ICC)法检测各组系膜细胞NF-κB蛋白的表达水平。 结果： (1)MTT法结果分析：不同浓度TNF-α组系膜细胞增殖水平明显高于空白对照组(P＜0.05)，在TNF-α诱导的48h内，于24h呈现增殖高峰，与6h组比较有统计学差异(P＜0.05)，各浓度曲格列酮干预组系膜细胞增殖水平明显低于TNF-α诱导组(P＜0.05)。 (2)RT-PCR结果分析：不同浓度TNF-α诱导组ICAM-1mRNA表达明显增高，与空白对照组比较有统计学差异(P＜0.05)，各浓度曲格列酮干预组系膜细胞ICAM-1mRNA表达明显低于TNF-α诱导组(P＜0.05)。 (3)ELISA结果分析：不同浓度TNF-α诱导组ICAM-1蛋白表达明显增高，与空白对照组比较有统计学差异(P＜0.05)，各浓度曲格列酮干预组系膜细胞ICAM-1蛋白表达明显低于TNF-α诱导组(P＜0.05)。 (4)ICC结果分析：不同浓度TNF-α诱导组NF-κB蛋白表达阳性率明显增高，与空白对照组比较有统计学差异(P＜0.05)，各浓度曲格列酮干预组系膜细胞NF-κB蛋白表达阳性率明显低于TNF-α诱导组(P＜0.05)。 结论： (1)TNF-α可增强系膜细胞增殖，上调细胞表面ICAM-1mRNA和蛋白的表达，并使NF-κB蛋白的表达增高，提示TNF-α可促进并加重系膜细胞炎症反应。 (2)曲格列酮可降低TNF-α诱导的系膜细胞增殖，并下调TNF-α诱导所致细胞表面ICAM-1mRNA和蛋白表达的增高，提示曲格列酮可抑制TNF-α引起的系膜细胞炎症反应。 (3)曲格列酮可降低TNF-α诱导的系膜细胞NF-κB蛋白的表达，提示曲格列酮可能通过抑制NF-κB信号传导途径减少TNF-α诱导的系膜细胞ICAM-1的表达。

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论文说明：符号说明

声明

第一部分 炎症对人肾系膜细胞增殖的影响

前言

1材料与方法

2实验结果

3讨论

4.结论

第二部分 曲格列酮对炎症诱导的人肾系膜细胞增殖的干预作用

前言

1材料与方法

2实验结果

3讨论

4结论

全文小结

参考文献

图片资料

文献综述：PPARγ与肾脏关系研究进展

致谢

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