参附注射液对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

摘要

目的：本文旨在从组织和细胞水平，探讨参附注射液(Shenfuinjection，SF)对大鼠移植肝脏在缺血再灌注损伤(Ischemic reperfusioninjury，IRI)中的保护作用及其具体机制。 方法：采用72只健康雄性SD(Sprague Dawley)大鼠，重190～220g，将其随机分为对照组和SF组(SF组受体在供肝植入门静脉血流恢复后即经尾静脉一次性注射SF 1ml/100g，对照组以相同的方式注射等量的生理盐水)，每组18对，采用二袖套法进行原位肝移植。其中每组按门静脉再灌注时间不同，又分为三组，分别于肝移植完成2h、4h和6h后收集受体的血清和肝组织，采用ELISA(酶联免疫吸附)法测定血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的浓度，免疫组织化学法测定核因子κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)的表达，原位杂交法测定细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)mRNA。另选用36只健康雄性SD大鼠，重180～210g，随机分为对照组和SF组(SF组每孔细胞悬液滴加0.5mlSF，对照组每孔给予同等量生理盐水)，其中每组按再氧化时间不同，又分为三组，分别进行原位肝脏灌注，所得细胞悬液进入缺氧-复氧模型(模拟体外IRI)。分别于复氧2h、4h和6h后取细胞悬液进行检测。采用ELISA法测定ICAM-l的表达，免疫细胞化学法测定NF-κB的表达。 结果：用于血清和组织学检测的大鼠中，在肝移植完成后2h、4h和6h，SF组TNF-α浓度分别为(576±60pg/ml、518±52pg/ml和421±35pg/ml)，较对照组的浓度(831±65pg/ml、715±69pg/ml和598±52pg/ml)明显低(P＜0.05)；同时，SF组组织的NF-κR和ICAM-lmRNA表达均明显弱于对照组。在复氧2h、4h和6h后，SF组SEC的ICAM-1浓度分别为(444±3.4 pg/ml、68±3.2 pg/ml和73±4.5pg/ml)，明显低于对照组的(59±4.3 pg/ml、98±6.5 pg/ml和111±5.7pg/ml，P＜0.05)；SF组SEC的NF-κB表达明显弱于对照组。 结论：SF能减轻IRI对移植肝脏特别是窦状内皮细胞的损伤，其机制是通过抑制肝组织中NF-κB的活化，有效下调TNF-α的分泌，降低ICAM-1的生成，从而减少白细胞对SEC的粘附，显著改善微循环。本研究可为提高肝移植质量提供一条新的途径。

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文摘

英文文摘

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声明

前言

1 材料与方法

2 实验结果

3 讨论

结论

参考文献

附插图

文献综述：肝脏缺血再灌注损伤的分子机制

致谢

攻读硕士期间发表的学术论文