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卷烟烟气诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化不同阶段基因表达谱验证及其机制研究

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前 言

第一部分 卷烟烟气诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化不同阶段基因表达谱验证

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

1.3统计学处理

2结果与讨论

2.1结果

2.2讨论

第二部分 卷烟烟气诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化不同阶段基因表达沉默机制研究

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

1.3统计学处理

2结果与讨论

2.1结果

2.2讨论

全文总结

参考文献

附 图

文献综述:DNA高甲基化与肿瘤关系的研究进展

致 谢

攻读学位期间发表的学术论文

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摘要

目的:对前期应用基因芯片技术分析的卷烟烟气(CSC)诱发人乳头瘤病毒永生化的人支气管上皮细胞(BEP2D)恶性转化不同阶段的基因表达谱进行验证,并初步探讨BEP2D细胞在CSC诱导下发生恶性转化的机制。 方法:采用RT-PCR、Northern blot及Real-time PCR技术验证基因表达谱中部分表达差异显著基因的变化;DNA甲基化抑制剂5-Aza-CdR处理CSC恶性转化的P40细胞后,运用RT-PCR技术检测部分表达下调基因的变化。 结果:基因表达谱中部分基因验证的结果与基因芯片结果一致;经DNA甲基化抑制剂5-Aza-CdR处理后,CSC恶性转化的P40细胞中部分表达显著下调基因,随药物作用浓度增大或作用时间延长呈表达明显增强的趋势。 结论:人类全基因组寡核苷酸芯片检测结果基本可反映CSC诱发BEP2D细胞恶性转化不同阶段基因的表达变化。DNA甲基化抑制剂可部分地逆转基因的高甲基化状态,使被部分或完全沉默的基因表达恢复,提示CSC诱导MYEOV等肿瘤相关基因发生高甲基化可能参与了细胞的恶性转化过程。

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