VA-姜黄素靶向脂质体的制备及细胞毒性研究

摘要

目的：以抗肝纤维化药物姜黄素为模型药物，维生素A为导向物制备靶向脂质体并对其制备工艺进行研究；游离姜黄素、姜黄素脂质体及VA-姜黄素脂质体分别作用于有视黄醇结合蛋白受体表达的肝星状细胞HSC-T6，并对其抑制细胞生长作用进行初步的细胞学评价和比较。
　　 方法：采用逆相蒸发法制备VA-CUR-L；将脂质体分别在4℃和25℃下密闭放置30d，以离心加速实验、包封率、VA结合率、过氧化值为指标考察其稳定性。采用MTT法考察游离CUR、CUR-L、VA-CUR-L对肝星状细胞HSC-T6的细胞毒性。
　　 结果：通过正交设计筛选出制备VA-CUR-L的最佳处方为：药脂比1：60，磷脂-胆固醇比例4：1，VA为3mg，pH值为6.5，超声时间5min，平均包封率为89.32％，VA结合率为61.34％。采用微孔滤膜-吸光度法检测脂质体，粒径小于1.58μm的粒子占有率为57％。细胞毒性实验结果显示，游离CUR、CUR-L及VA-CUR-L的IC50值分别为31.53μg/mL、14.95μg/mL和8.28μg/mL。
　　 结论：本文采用UV法测定VA-CUR-L中药物的含量、包封率，采用Sephadex G-50凝胶柱分离脂质体，方法准确、简便、快速。稳定性实验结果表明，脂质体于4℃贮存时，较稳定。VA-CUR-L的体外释药实验表明，药物经包封后具有较好的缓释效果。MTT法结果显示游离CUR、CUR-L、VA-CUR-L在HSC-T6细胞株上均表现出抑制效果，抑制率的顺序为：VA-CUR-L>CUR-L>CUR，有浓度依赖趋势。VA-CUR-L可与表达相应受体的肝星状细胞特异性结合并发挥抑制作用，作用优于游离CUR和CUR-L。由此可知，用VA作为TDDS系统中的导向物，实现药物细胞水平上的靶向释放，提高药物的生物利用度是可行的。