肝癌细胞系Hep3B中CD133+细胞亚群的分离及其特性的研究

摘要

目的:研究CD133在人肝癌细胞系Hep3B中的表达以及CD133+细胞的体外增殖、自我更新及体内成瘤能力,初步探讨肝癌中CD133+细胞亚群的干细胞特性。
　　 方法:流式细胞仪检测未分选的Hep3B细胞中CD133+细胞表达情况:免疫磁珠分选技术纯化CD133+肿瘤细胞;MTT法检测CD133+细胞体外增殖能力;无血清培养纯化的CD133+肿瘤细胞,观察其生长分化情况;流式细胞仪检测无血清悬浮培养纯化的CD133+肿瘤细胞中CD133+的表达及非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷(NOD/SCID)接种实验观察其体内成瘤能力。
　　 结果:流式细胞仪检测未分选的Hep3B细胞中有9.13％的细胞呈CD133+表达;免疫磁珠富集的CD133+肿瘤细胞在无血清培养基中悬浮生长,并可以形成肿瘤细胞球,且在1,3,5,7天的紫外吸光度(A)值均高于相同条件下未分选细胞及CD133细胞(P＜0.05);经流式细胞仪检测无血清悬浮培养纯化的CD133+细胞其中有49.48%的细胞呈CD133+表达;CD133+肿瘤细胞的体内成瘤能力明显高于CD33-细胞及未分选细胞。
　　 结论:肝癌细胞系Hep3B中CD133+细胞亚群比其他细胞亚群具有更强的增殖、分化和成瘤能力,是具有肝癌干细胞特性的细胞亚群。