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【6h】

双氢青蒿素对PC-3和DU145细胞迁移和侵袭能力的影响及机制

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目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

1 材料、试剂、仪器

1.1 细胞系

1.2 主要试剂

1.3 主要仪器

1.4 药物的配制

1.5 动物

2 方法

2.1 细胞培养

2.2 前列腺癌PC-3细胞处理及分组

2.3 细胞划痕实验

2.4 细胞侵袭实验

2.5 荧光定量PCR检测

2.6 western blot检测

2.7 模型制备

2.8 统计学处理

3 结果

3.1 DHA抑制PC-3和DU145细胞的迁移

3.2 DHA抑制细胞的侵袭能力

3.3 DHA抑制Vimentin和促进CDH1的转录和表达

3.4 免疫组化法

4 讨论

全文总结

参考文献

文献综述 双氢青蒿素抗肿瘤作用机制的研究进展

致谢

攻读学位期间的研究成果及发表的学术论文目录

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摘要

目的:探讨双氢青蒿素(DHA)对PC-3和DU145细胞迁移和侵袭能力的影响及其可能机制。
  方法:第一部分:不同浓度(0μmol·L-1、25μmol·L-1、50μmol·L-1和100μmol·L-1)的DHA分别作用于PC-3和DU145细胞48h后,运用细胞划痕实验和侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。提取各组细胞的总mRNA和蛋白,分别进行荧光定量PCR和Western blot实验,检测Vimentin和CDH1的转录和表达水平。第二部分:采用人前列腺癌PC-3和DU145细胞建立裸鼠种植瘤模型,18只模型鼠随机分为对照组、DMSO组(二甲基亚砜1 mL/kg)、DHA组(DHA200μmol/kg),经13天干预后,免疫组织(SP)化学法检测侵袭相关基因Vimentin和CDH1的表达水平。
  结果:不同浓度(25μmol·L-1、50μmol·L-1和100μmol·L-1)的DHA均能显著抑制PC-3和DU145迁移和侵袭能力(P<0.05),与对照组比较,不同浓度的DHA均能显著抑制Vimentin和促进CDH1的转录和表达水平(P<0.05)。25μmol·L-1的DHA抑制Vimentin和促进CDH1蛋白的表达最为明显。免疫组化结果显示,在两种细胞中,DHA组CDH1的表达均高于对照组和溶剂组(P<0.05);Vimentin的表达均低于对照组和溶剂组(P<0.05)。
  结论:不同浓度的DHA干预后能显著抑制PC-3和DU145细胞的迁移和侵袭能力,而在体肿块生长速度受抑制进一步证实DHA具有抑制癌细胞迁移和侵袭能力。而从免疫印迹和免疫组化结果我们推测DHA可能通过干扰Vimentin和CDH1蛋白的表达相关而起到抑制癌细胞迁移和侵袭的效果。

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