超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡对大鼠类风湿关节炎的实验研究

摘要

第一部分、携氧载紫杉醇脂质微泡对大鼠关节的生物相容性观察及在体超声辐照参数筛选
　　目的：探讨制备的携氧载紫杉醇脂质微泡对大鼠关节组织生物相容性，筛选出超声关节辐照靶向破坏脂质微泡合适的超声参数，为超声联合携氧载紫杉醇脂质微泡治疗大鼠类风湿关节炎提供依据。
　　方法：取雌性SD大鼠5只，一侧膝关节注射生理盐水，另一侧膝关节注射相同剂量携氧载紫杉醇脂质微泡，观察大鼠基本情况，记录膝关节直径变化，一周后取大鼠膝关节行组织切片观察。取雌性SD大鼠12只，随机分为6组，每组2只。膝关节腔内注射制备的携氧载紫杉醇脂质微泡，分别以超声强度（0、2、3.5w/cm2）和辐照时间（0、300、600s）关节腔外辐照，抽取关节腔内液，光镜观察携氧载紫杉醇脂质微泡的破碎情况，筛选合适的超声参数。
　　结果：大鼠膝关节注射携氧载紫杉醇脂质微泡后，关节直径无变化，组织切片未见滑膜炎症细胞浸润。在不同超声强度和辐照时间下，携氧载紫杉醇脂质微泡有不同程度的破坏，其中300s，2w/cm2组微泡破坏情况较理想。
　　结论：携氧载紫杉醇脂质微泡关节腔注射，对大鼠膝关节生物相容性良好，无致炎作用。超声强度2w/cm2、辐照时间为300s，关节腔外超声辐照，可较好靶向破坏携氧载紫杉醇脂质微泡。
　　第二部分、超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡对CIA大鼠关节炎治疗作用及机制的研究
　　目的：研究超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡对CIA大鼠关节炎病变的治疗作用及作用机制，为类风湿关节炎关节的靶向治疗提供实验依据。
　　方法：用牛Ⅱ型胶原混合完全弗氏佐剂诱导法建立CIA大鼠模型。取模型大鼠随机分为：B、模型对照组(Model group)；C、紫杉醇组(PTX group)；D、超声组(US group)；E、携氧脂质微泡组(OLMBs group)；F、携氧载紫杉醇脂质微泡组(OPLMBs group)；G、超声联合携氧载紫杉醇脂质微泡组(OPLMBs+US group)；H、甲氨蝶呤组(MTX group)，同时设正常对照组（Normol group，A）；膝关节分别注射生理盐水或相应脂质微泡，并关节外超声辐照干预。观察大鼠的一般情况，记录体重和膝关节直径的变化，计算关节肿胀指数。末次给药结束后隔日对各组大鼠行X线摄片，取大鼠膝关节行组织切片观察，Western Blot法检测滑膜组织中HIF-1α、VEGF的表达，Elisa法检测关节液中 IL-6、TNF-α含量，免疫组化法观察滑膜组织中α-SMA的表达。
　　结果：Ⅱ型牛胶原混合完全弗氏佐剂免疫大鼠可成功诱导大鼠类风湿关节炎模型。超声联合携氧载紫杉醇脂质微泡能明显改善模型CIA大鼠关节肿胀指数和病理炎症评分、关节X线影像学变化，减少模型大鼠关节液中IL-6、TNF-α含量，抑制病变滑膜组织中HIF-1α、VEGF、α-SMA的表达，差异具有统计学意义。
　　结论：超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡可明显抑制CIA大鼠的关节炎症程度，其机制可能与抑制滑膜细胞的活化增殖，改善局部乏氧微环境，减少病变关节炎性因子TNF-α、IL-6生成，降低滑膜组织HIF-1α、VEGF、α-SMA表达，抑制关节血管翳的形成有关。研究结果为类风湿关节炎靶向关节病变治疗提供实验依据，为类风湿关节炎关节病变治疗提供新的手段和思路。

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前言

参考文献

第一部分 携氧载紫杉醇脂质微泡对大鼠关节的生物相容性观察及在体超声辐照参数筛选

1 材 料

2 方 法

3 结 果

4 讨 论

5 小 结

参考文献

第二部分 超声介导携氧载紫杉醇脂质微泡对CIA大鼠关节炎治疗作用及机制的研究

1 材 料

2 方 法

3 结 果

4 讨 论

5 小 结

参考文献

全文总结

文献综述: 滑膜成纤维细胞对类风湿关节炎关节病变作用研究进展

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