CILP2增加氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞形成及机制研究

摘要

第一部分、CILP2表达上调对氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞形成的影响
　　目的：
　　在体外，建立泡沫细胞模型，探讨CILP2表达上调，是否对氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞形成产生影响。
　　方法：
　　用佛波酯（PMA）处理THP-1细胞24小时，诱导成巨噬细胞。诱导成功后与氧化低密度脂蛋白相互作用24小时，在体外建立泡沫细胞模型。用腺病毒载体Ad-CILP2感染巨噬细胞，实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测CILP2表达上调的效率，油红染色处理细胞爬片，观察CILP2表达上调，对氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞形成的影响。
　　结果：
　　油红染色结果显示泡沫细胞体外模型构建成功。利用Ad-CILP2感染细胞后，巨噬细胞内CILP2 mRNA水平明显增高(P＜0.01)，且Ad-CILP2+oxLDL组比Ad-GFP+oxLDL组泡沫细胞形成明显增多。
　　结论：
　　CILP2增加氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞形成。
　　第二部分、CILP2上调增加氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞形成过程的机制研究
　　目的：
　　探讨CILP2上调增加氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞形成过程的可能机制。
　　方法：
　　用荧光标记的氧化型低密度脂蛋白（Dil-oxLDL）作用于巨噬细胞，荧光倒置显微镜观察对脂质的摄取情况。利用RT-PCR检测介导脂质摄取的清道夫受体CD36、LOX-1、SR-A mRNA的表达。利用western blot检测CD36蛋白水平的表达。利用RT-PCR检测参与胆固醇外流调节的ABCA1、ABCG1 mRNA的表达。用PPAR-γ预处理细胞24小时后，利用RT-PCR检测CD36、LOX-1 mRNA的表达。
　　结果:
　　CILP2增加荧光标记的氧化型低密度脂蛋白的摄取。与Ad-GFP+oxLDL组比，Ad-CILP2+oxLDL组CD36 mRNA的表达明显升高(P＜0.01),LOX-1 mRNA的表达明显升高（P＜0.05），但CILP2表达上调对SR-A、ABCA1、ABCG1 mRNA的表达无影响。CILP2使CD36蛋白的表达增加(P＜0.01)。巨噬细胞给予PPAR-γ激动剂后，CD36 mRNA的表达升高（P＜0.05）。而给予PPAR-γ抑制剂后，CD36 mRNA的表达降低（P＜0.05）。用PPAR-γ激动剂、抑制剂处理对LOX-1 mRNA的表达无影响。
　　结论:
　　CILP2通过PPAR-γ信号通路的激活作用，使巨噬细胞表面CD36的表达增加，从而增加脂质摄取导致泡沫细胞的形成增多。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

第一部分：CILP2表达上调对氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞形成的影响

1材料与方法

1.1 细胞株

1.2 主要材料试剂

1.3 主要设备仪器

1.4 主要试剂配制

1.5 方法

1.6 统计

2结果

2.1THP-1细胞中CILP2蛋白的表达

2.2PMA诱导THP-1细胞成巨噬细胞

2.3CILP2过表达腺病毒载体（Ad-CILP2）对THP-1源性巨噬细胞CILP2表达的影响

2.4Ad-CILP2对ox-LDL诱导的巨噬源性泡沫细胞形成的影响

3讨论

第二部分CILP2上调增加氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞形成过程的机制研究

1材料及方法

1.1主要材料及仪器

1.2方法

1.3统计

2结果

2.1CILP2上调对THP-1源性泡沫细胞摄取Dil-oxLDL的影响

2.2CILP2上调在泡沫细胞形成过程中，对CD36 mRNA表达的影响

2.3CILP2上调在泡沫细胞形成过程中，对CD36蛋白表达的影响

2.4CILP2上调在泡沫细胞形成过程中，对LOX-1 mRNA表达的影响

2.5CILP2上调在泡沫细胞形成过程中，对SR-A mRNA表达的影响

2.6CILP2上调在泡沫细胞形成过程中，对ABCA1 mRNA表达的影响

2.7CILP2上调在泡沫细胞形成过程中，对ABCG1 mRNA表达的影响

2.8 CILP2上调对巨噬细胞中PPAR-γmRNA表达的影响

2.9 PPAR-γ参与CILP2上调增加泡沫细胞形成中CD36表达的过程

2.10 PPAR-γ对CILP2上调增加LOX-1 mRNA表达的影响。

3讨论

参考文献

全文总结

文献综述：泡沫细胞与动脉粥样硬化研究进展

致谢

硕士期间发表论文