紫草素对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞增殖凋亡的影响及相关机制的研究

摘要

目的：
　　研究紫草素对人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞增殖与凋亡的影响及其相关作用机制。
　　方法：
　　1.以NB4细胞株作为研究对象，用梯度浓度的紫草素分别作用于NB4细胞不同时间后，CCK-8实验测定细胞增殖情况；
　　2.以0.3μmol/L紫草素作用于NB4细胞，培养1 d后，通过流式细胞术检测细胞周期的改变和凋亡的改变；
　　3.经Hochest33342实验，通过荧光显微镜检测NB4细胞的胞核的形态学改变；
　　4.Western blot检测细胞c-Myc,PARP,Caspase3,Cleaved PARP,Cleaved Caspase3,ERK,p-ERK,JNK,p-JNK,p38MAPK及p-p38MAPK蛋白表达情况；
　　5.构建NB4细胞裸鼠移植瘤模型，通过描绘肿瘤生长曲线分析紫草素对裸鼠肿瘤发展情况的作用；
　　6.通过免疫组化技术检测紫草素对抑制瘤组织中增殖指标 c-Myc表达的影响。
　　结果：
　　1. NB4细胞经紫草素处理后，细胞活力受到抑制(P＜0.01)，并且具有时间依赖性及浓度依赖性；
　　2.流式细胞术检测到NB4细胞经紫草素处理后，G1期细胞比例上升(P＜0.01)，G2期和S期细胞比例下降(P＜0.01)；细胞凋亡率明显增加(P＜0.01)；
　　3.紫草素处理NB4后，经Hochest33342着色，在荧光显微镜下发现细胞表现出核固缩，染色质聚集凝集，核破碎等现象；
　　4.紫草素作用细胞1 d后，Western blot检测到凋亡相关蛋白Cleaved PARP,Cleaved Caspase3表达明显增多(P＜0.01)，p-JNK和p-p38MAPK蛋白水平明显升高(P＜0.01)，p-ERK和c-Myc蛋白表达水平明显降低(P＜0.05)；
　　5.紫草素能够显著抑制移植瘤生长(P＜0.05)；
　　6.免疫组化结果显示，紫草素处理组增殖蛋白c-Myc表达与对照组相比显著降低(P＜0.05)。
　　结论：
　　紫草素可能通过调节MAPK通路和c-Myc表达水平来抑制NB4细胞增殖诱导其凋亡，并可抑制NB4细胞裸鼠移植瘤生长。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

第一部分 紫草素对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞增殖和凋亡的影响及其相关机制的研究

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第二部分 紫草素对人NB4细胞小鼠移植瘤生长的抑制作用

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

全文总结

文献综述:紫草素的药理功能研究进展

致谢

读硕士期间发表文章