MCMV早期感染对小鼠CD8+T、γδT和NK细胞功能的影响

摘要

目的： 通过体内和体外实验观察小鼠巨细胞病毒（Murine cytomegalovirus,MCMV)早期感染对小鼠脾脏CD3+T、γδT和NK细胞亚群和功能变化的影响。 方法: 分别用5×104PFU和5×105PFU滴度的MCMV Smith MSGV株感染C57BL/6小鼠9天，提取脾脏淋巴细胞。提取C57BL/6小鼠脾脏淋巴细胞，在体外分别用1×1O4PFU、1×1O5PFU和1×1O6PFU滴度MCMV感染24 h和48 h。多色流式细胞术检测脾脏CD8+/CD4+T、γδT和NK细胞分泌细胞因子（IFNγ、IL-2、TNF-α)和表达颗粒酶B、CD107a的水平，及NK1.1+CD49b+CD3-NK细胞亚群(CD11b-KLRGl1-，CD11b+KLRG1-，CD11b+KLRG1+)的变化。用五聚体检测MCMV特异性CTL(CD3+CD8+Pentamer+)。 结果： 与对照组比较，MCMV体内感染小鼠后， CD8+T细胞分泌的IFN-γ、IL-2和表达的颗粒酶B，γδT细胞表达的颗粒酶B、CD107a水平，及CD25+CD4+T细胞数量显著增加；5×105 PFU感染组CD25+CD4+T细胞数较5×104PFU感染组低，其余不同感染组之间无统计学差异；体内感染后MCMV特异性CTL比例较对照组也增加，但不同病毒滴度感染组间无差异；MCMV体内感染小鼠后CD11bKLRG1-N K细胞数较对照组减少，但CDllb+KLRGl+N K细胞明显增加，不同病毒滴度间无统计学差异。不同病毒滴度MCMV体外感染24 h和48h后，CD8+T细胞的活化表面分子CD69均比对照组增加，且感染48h后1×106PFU组CD69表达水平髙于1×104PFU、1×105 PFU感染组；体外感染24 h，CD4+T细胞表达的CD69较对照组增加，且有11O5PFU、11O6PFU感染组高于11O4PFU感染组；体外MCMV感染24 h后，1×106PFU感染组CD8+T细胞分泌的IFN-γ较对照组、11O4PFU和11O5PFU感染组增加；体外感染24 h和48 h后各感染组分泌的TNF-α均较对照组增加，且随病毒滴度升高TNF-α分泌增加；体外感染24h后CD4+T细胞分泌的TNF-α较对照组增加，感染48 h后1×1O6PFU感染组髙于对照组和其他两感染组；CD8+T细胞和CD4+T细胞各组间IL-2分泌和颗粒酶表达未见明显差异;与对照组相比，体外感染24h和48h后各感染组均可见NK细胞IL-2和颗粒酶B水平升髙，且均有1×1O6PFU感染组IL-2和颗粒酶B表达和分泌水平髙于其他感染组。 结论： MCMV早期感染后CD8+T、γδT和N K细胞功能可能较前增强。

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