染色质重塑因子Brg1通过STAT6促进哮喘气道黏液高分泌的研究

摘要

目的： 本实验旨在研究染色质重构复合物核心催化亚基（Brg1）对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及探讨其可能作用机制。 方法： 将6～8周龄SPF级雌性野生型C57bl/6小鼠和Brg1-/-小鼠(AEC2s上特异性条件敲低Brg1的C57bl/6小鼠)随机分为四组：Control（正常对照组）、Asthma（哮喘组）、Brg1-/-( Brg1敲低对照组)和Brg1-/-+Asthma（ Brg1敲低后构建哮喘模型组），每组10只。Asthma组和Brg1-/-+Asthma组用鸡卵清蛋白OVA制备过敏性哮喘模型，对照组用生理盐水代替。于最后一次雾化后24h内收取建模标本。PAS染色检测各组小鼠气道杯状细胞的增生情况和黏液分泌量；ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液中黏蛋白MUC5AC和细胞因子IL-13水平；荧光定量PCR检测肺组织匀浆黏蛋白MUC5AC水平；免疫组化检测各组小鼠气道黏蛋白MUC5AC和STAT6的表达和定量；Western blot检测各组小鼠肺组织中STAT6、p-STAT6水平。 结果： Asthma组与Control组相比，气道杯状细胞增生明显、黏液分泌增加，BALF中IL-13、MUC5AC表达增加，肺组织MUC5AC mRNA表达显著升高，同时STAT6和磷酸化STAT6明显上调；而当 AEC2s上特异性条件敲低Brg1后，小鼠气道杯状细胞增生和黏液分泌均显著减少。而Brg1-/-+Asthma组较Asthma组气道杯状细胞增生和黏液分泌均显著减少，BALF中IL-13、MUC5AC表达明显降低，肺组织MUC5AC mRNA表达显著降低，同时肺组织STAT6和磷酸化STAT6显著下调。 结论： Brg1-/-敲低的小鼠建立哮喘模型时气道黏液分泌较野生型小鼠减轻,其可能通过影响STAT6从而抑制黏蛋白MUC5AC的表达，抑制支气管哮喘气道黏液高分泌，表明Brg1具有促进哮喘气道黏液高分泌的作用。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1 材料和方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果

2.1 各组小鼠肺组织糖原PAS染色结果

2.2 各组小鼠BALF上清液中MUC5AC、IL-13含量

2.3 各组小鼠气道上皮黏蛋白MUC5AC表达情况

2.4 各组小鼠肺组织MUC5AC mRNA 表达情况

2.5 各组小鼠肺组织中STAT6和pSTAT6表达情况

3 讨论

参考文献

全文总结

文献综述:哮喘黏液高分泌的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间的研究成果及发表的学位论文