基于DNA纳米蝎的肿瘤细胞内基因沉默新方法研究

摘要

癌症正逐渐成为威胁人类健康的一大隐患，其传统治疗方式主要是手术以及放化疗。这些治疗方法虽然挽救了无数生命，但也面临着手术禁忌症、预后不良等多种挑战，因此癌症治疗新方法仍是亟待探索研究的重要领域。近年来，高效精准的基因治疗方法在肿瘤治疗中正发挥着重要的作用。因此，本课题设计了一种适配体和DNA酶共同作用的多功能 DNA纳米蝎的纳米结构（称为 AptDzy-DNS），用于在肿瘤细胞中高效靶向递送并进行基因治疗。设计自组装的纳米蝎其功能类似于“蝎子”，它的头部包含了特定的适配体形成“蝎刺”，通过与细胞表面的适配体受体特异性结合从而靶向识别肿瘤细胞，两臂末端的DNA酶形成“蝎钳”，在Mg2+的协助下，完成对靶mRNA的剪切。在基因沉默过程中，剪切后的mRNA不能完成相应的蛋白质翻译，阻止癌细胞生长从而实现基因沉默。结果表明，多功能纳米蝎不仅能完成对SK-BR-3和MDA-MB-231两种乳腺癌细胞的特异性识别，而且通过RT-PCR和Western blot试验中，mRNA含量的降低及蛋白表达量的减少显示了对靶向肿瘤细胞的治疗作用。因此，本研究为肿瘤细胞靶向治疗提供了新思路，也显示了纳米蝎在人类癌症靶向治疗中的极大应用前景。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1实验部分

1.1材料与试剂

1.2仪器

1.3纳米蝎的制备

1.4 PAGE电泳和原子力显微镜（AFM）成像

1.5细胞培养和CCK-8实验

1.6蛋白质印迹实验（Western blot）

1.7 RT-PCR实验

2结果与讨论

2.1纳米蝎介导基因治疗的原理

2.2多功能纳米蝎的表征

2.3细胞外纳米蝎剪切活性的可行性分析

2.4细胞外实验条件优化

2.5纳米蝎介导肿瘤细胞可行性分析

2.6纳米蝎的内化过程

2.7纳米蝎的细胞毒性实验和增殖实验

2.8纳米蝎的基因沉默实验

3全文总结

参考文献

文献综述：用于癌症治疗的适体纳米药物

1引言

2在临床中的适体药物

3适体药物的设计

4适体药物的体内应用

5展望

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的论文