声明
英汉缩略语名词对照
前言
第一部分 生物信息学分析NSCLC中差异表达基因
1 实验材料
1.1 生物数据库及在线分析软件
1.2 数据库样本信息
2 实验方法
2.1 数据分析
2.2 热图绘制
2.3 筛选共同差异表达基因
2.4 基因功能分析
2.5 蛋白-蛋白互作分析
2.6 统计学分析
3 实验结果
3.1 GEO数据库筛选NSCLC组织中差异表达基因
3.2 对NSCLC中差异表达基因进行功能注释
3.3 对NSCLC中差异表达基因进行蛋白-蛋白互作分析
4 讨论
第二部分 SPINK1在NSCLC患者及细胞系中表达增加
1 实验材料
1.1 生物数据库及临床标本信息
1.2 细胞
1.3 主要试剂
1.4 主要试剂配制
1.5 主要仪器
2 实验方法
2.1细胞复苏
2.2 细胞换液
2.3细胞传代
2.4细胞冻存
2.5 细胞总RNA提取
2.6 逆转录PCR
2.7 qRT-PCR
2.8总蛋白提取
2.9总蛋白定量
2.10免疫印迹实验（western blot assay）
2.11 ELISA检测
2.12统计学分析
3 实验结果
3.1 NSCLC组织中SPINK1表达上调
3.2 SPINK1在NSCLC患者体液中表达水平增加
3.3 SPINK1在人NSCLC细胞系中表达上调
4 讨论
第三部分 SPINK1促进NSCLC发生发展进程
1 实验材料
1.1 材料与试剂
1.2 主要仪器
1.3 主要试剂配制
2 实验方法
2.1 细胞培养
2.2 siRNA体外转染
2.3 qRT-PCR
2.4 WB
2.5 CCK8实验
2.6 生长曲线绘制
2.7 重组蛋白刺激细胞
2.8 流式细胞术检测细胞周期
2.9 流式细胞术检测细胞凋亡
2.10 Transwell实验
2.11 划痕愈合实验
2.12 统计学分析
3 实验结果
3.1 应用siRNA靶向沉默SPINK1
3.2 SPINK1促进NSCLC细胞增殖
3.3 沉默SPINK1致细胞周期停滞
3.4 沉默SPINK1诱导细胞自噬及细胞凋亡
3.5 沉默SPINK1对NSCLC细胞迁移能力未见显著影响
3.6 沉默SPINK1降低PI3K/AKT和MEK/ERK磷酸化水平
4 讨论
全文总结
参考文献
文献综述:SPINK1在人类肿瘤发生发展中的作用
致谢
攻读硕士学位期间的研究成果及发表的学位论文
