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【6h】

PGC-1α通过线粒体介导的肿瘤相关巨噬细胞极化状态对乳腺癌细胞转移潜能的作用及可能机制

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英汉缩略语名词对照

前言

1 试剂材料与仪器设备

1.1 主要材料及试剂

1.2 主要仪器及设备

1.3 主要试剂的配置

2 方法

2.1 细胞培养

2.2 PMs的提取及培养

2.3 shRNA转染

2.4 实验分组

2.5 TAMs极化状态测定

2.6 TAMs流式ROS含量测定

2.7 ATP水平实验检测

2.8 mtDNA水平实验检测

2.9 Western blot检测

2.9.1 细胞蛋白的提取

2.9.2 聚丙烯酰胺凝胶配制及电泳

2.9.3 电转

2.9.4 封闭及抗体孵育

2.10 Transwell侵袭/迁移实验

2.11 创伤愈合实验

2.12 统计学分析

3 结果

3.1 shRNA转染

3.2 TAMs中PGC-1α表达变化

3.3 TAMs中PGC-1α对线粒体功能的影响

3.3.1 TAMs中PGC-1α对ATP和ROS水平的影响

3.3.2 TAMs中PGC-1α对线粒体功能相关蛋白的影响

3.3.3 TAMs中PGC-1α对mtDNA转录水平的影响

3.4 PGC-1α对TAMs极化的影响

3.4.1 流式细胞仪检测PGC-1α对TAMs极化的影响

3.4.2 Western blot检测PGC-1α对TAMs极化的影响

3.5 TAMs细胞中PGC-1α对4T1细胞生物学特性的影响

3.5.1 Transwell检测TAMs的PGC-1α对4T1细胞侵袭能力的影响

3.5.2 Transwell检测TAMs的PGC-1α对4T1细胞迁移能力的影响

3.5.3 创伤愈合实验检测TAMs的PGC-1α对4T1细胞愈合能力的影响

3.6 TAMs细胞中PGC-1α对4T1细胞的EMT相关蛋白表达的影响

4 讨论

参考文献

文献综述:通过代谢重编程调控乳腺肿瘤微环境的功能

致谢

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