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流体剪切应力对人绒毛滋养层细胞迁移运动的影响

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1 绪论

1.1 问题的提出及研究意义

1.2 国内外研究现状

1.3 研究目的和研究内容

1.4 技术路线

1.5 本文的创新之处

2 滋养层细胞的培养及细胞鉴定

2.1 引言

2.2 实验材料、试剂和仪器设备

2.3 实验方法

2.4 实验结果

2.5 讨论

3 人脐静脉内皮细胞的原代培养

3.1 引言

3.2实验材料、试剂和仪器设备

3.3 实验方法

3.4 实验结果

3.5 讨论

4 流体剪切应力对滋养层细胞迁移的影响

4.1 引 言

4.2 实验材料与方法

4.3 数据统计与分析

4.4 实验结果

4.5 讨 论

5 结论与展望

5.1全文主要研究工作及主要结论

5.2 后续研究工作的展望

致谢

参考文献

附录

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摘要

多数哺乳动物母体受孕后,其胚泡的着床、胎盘的形成和发育都与滋养层细胞密切相关。尤其在胎盘的形成和发育过程中,滋养层细胞起到了举足轻重的作用:滋养层细胞群体先入侵子宫内膜基质并与毛细血管相接触,侵袭进入毛细血管后继续迁移,最后定居于母体螺旋动脉并对其结构进行重建,以确保胎儿胎盘系统在低压情况下得到充足的血液供应。在体内,滋养层细胞入侵子宫脉管的方向是从毛细血管到子宫螺旋动脉,而动脉血液流动方向则是从子宫螺旋动脉指向毛细血管。这就提示体内滋养层细胞是沿着与血流相反的方向迁移到达子宫螺旋动脉的,是一种特殊的逆血流而上的迁移。因此,通过在体外对细胞进行相关力学模拟来研究流体剪切应力对滋养层细胞迁移的影响对逆流迁移机制的探索有重要的意义。
  目的通过研究流体剪切应力对原代培养及与血管内皮细胞共培养的滋养层细胞迁移行为的影响,探索滋养层细胞迁移的相关调控因素及体内逆向迁移的运动机制。
  方法运用细胞原代培养技术对人胚胎绒毛滋养层细胞和人脐静脉内皮细胞进行原代培养;采用体外细胞力学加载模型并通过细胞形态学观察和图像软件分析等方法分别对独立培养的滋养层细胞、与血管内皮细胞共培养的滋养层细胞在不同剪切应力强度下的运动方向及速率等进行检测和量化分析。
  结果本文建立了人胚胎绒毛滋养层细胞的原代培养方法;创建了人脐静脉血管内皮细胞与滋养层细胞的共培养模型;体外独立培养的滋养层细胞,在零剪切应力时细胞存在无方向性迁移运动,而在一定的剪切应力范围内,随剪切应力强度的增加,细胞顺流迁移现象逐渐明显,迁移方向趋于剪切应力方向,迁移速率有变大趋势;与独立培养的滋养层细胞相比,血管内皮细胞共培养条件下的滋养层细胞在有剪切应力或无剪切应力时,细胞迁移均不明显,细胞的迁移速度和在剪切应力方向上的净位移等都趋于稳定。
  结论流体剪切应力是影响滋养层细胞迁移行为的一个重要因素,影响到滋养层细胞的迁移方向、迁移速率及位移大小等,对滋养层细胞的迁移方向具有导向作用,对滋养层细胞固有的随机性迁移具有强干扰性;同时内皮细胞作为滋养层细胞迁移的基层,对剪切应力作用下的细胞定位起到一定作用,也对滋养层细胞的迁移性及其体内逆流性迁移都有着极其重要的作用。

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