聚乳酸微柱阵列型拓扑结构基底上SH-SY5Y细胞VEGF及IL-8的分泌及表达

摘要

以紫外光光刻、硅蚀刻及复制模塑技术制备了聚乳酸（PLLA）微柱阵列型拓扑结构基底，考察了SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞在拓扑结构基底上的生长及血管内皮生长因子（VEGF）和白细胞介素-8（IL-8)的分泌及表达。细胞的形态及铺展采用扫描电子显微图像进行分析，细胞在拓扑结构基底上生长24h后的VEGF及IL-8分泌量采用ELISA进行检测，VEGF及IL-8在mRNA水平的表达量以实时定量PCR进行评价。实验中成功制备了微柱名义直径为2μm和4μm、微柱名义间距为2μm和7μm的4种拓扑结构基底。研究发现，SH-SY5Y细胞在2-2μm(微柱名义直径-名义间距）、4-2μm、4-7μm拓扑结构基底上的VEGF和/或IL-8分泌量和表达较之PLLA平面基底上相应值出现上调，而在2-7μm拓扑结构基底上VEGF及IL-8二者均表现出表达和分泌量大幅度和明显的上调。与在PLLA平面基底上相比，SH-SY5Y细胞在拓扑结构基底上表现出细胞形态（铺展面积及圆度）的明显变化，细胞VEGF及IL-8分泌量和表达的上调伴随细胞铺展面积的明显降低。上述结果表明微柱阵列型拓扑结构是影响SH-SY5Y细胞VEGF、IL-8分泌及表达的重要微环境因素，VEGF和IL-8可能构成SH-SY5Y细胞在拓扑结构基底上生长的重要分泌物标志。

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1 绪 论

1.1 问题的提出与意义

1.2. 国内外研究现状

1.3. 研究目的和研究内容

1.4 技术路线

1.5 创新之处

2 聚乳酸微柱阵列型拓扑结构基底的加工及与SH-SY5Y细胞的复合

2.1 引言

2.2 仪器和材料试剂

2.3 PLLA微柱阵列型拓扑结构基底的制备

2.4 人神经母细胞瘤细胞的培养及与微柱阵列型拓扑结构基底的复合

2.5 实验结果

2.6 讨论和分析

2.7 本章小结

3 SH-SY5Y细胞在微柱阵列型拓扑结构基底上VEGF和IL-8蛋白分泌水平的评价

3.1 引言

3.2 仪器与材料试剂

3.3 方法与步骤

3.4 结果及分析

3.5 讨论

3.6 本章小结

4 SH-SY5Y细胞在微柱阵列型拓扑结构基底上VEGF、IL-8的mRNA相对表达水平

4.1 引言

4.2 仪器和材料试剂

4.3 方法与步骤

4.4 实验结果

4.5 讨论

4.6 本章小结

5 主要结论及后续工作展望

5.1 主要结论

5.2 后续工作展望

致谢

参考文献

附录