结核杆菌培养滤液蛋白对变应性鼻炎大鼠气道IFN-γ和IL-5表达的影响

摘要

研究背景：
　　 变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)和支气管哮喘(bronchial asthma,BA)是上、下气道常见的变应性疾病，其发病率有逐年增高的趋势，严重影响人类的生活质量。研究表明变应性鼻炎和支气管哮喘常同时存在。哮喘患者常伴有鼻炎，而鼻炎患者更易出现哮喘。大约38％的变应性鼻炎患者并发哮喘，而大概80％的哮喘患者有慢性鼻部症状。现在“一种气道，一种疾病”的观点已被广泛接受。“整合性气道疾病”、“慢性变应性气道炎症综合征”等概念形象地体现了这种一致性和相关性。2001年世界卫生组织出版的《变应性鼻炎及其对哮喘的影响》（ARIA），在论述了变应性鼻炎的同时，专门指出了对伴发哮喘的影响。
　　 目前，变应性气道炎症的治疗方法主要有：避免接触变应原、药物治疗和免疫治疗等。避免接触变应原难以做到，药物治疗只是改善症状，而免疫治疗从疾病发生的始动环节进行免疫调节，是世界卫生组织(WHO)推荐使用的唯一对因治疗手段。结核分枝杆菌培养滤液蛋白(Culture filtrate protein，CFP) 是结核分枝杆菌培养上清中的蛋白混合物,能刺激T细胞高效分泌IFN-γ,目前主要用于结核的诊断方面。
　　 本研究以卵蛋白为致敏原建立变应性鼻炎大鼠模型，观察上、下气道的炎症反应及IFN-γ和IL-5表达的改变。同时CFP经鼻腔给药干预，观察CFP对变应性鼻炎大鼠上、下气道炎症反应及IFN-γ和IL-5表达的影响，为CFP作为一种免疫调节剂治疗变应性气道炎症提供试验依据。
　　 第一部分：
　　 目的：
　　 通过对大鼠变应性鼻炎模型上、下气道炎症反应的研究，探讨上、下气道炎症反应的相关性。
　　 方法：
　　 雄性SD(SPF级)大鼠随机分为2组：正常对照组、模型组，每组10只。以卵蛋白为致敏原建立大鼠变应性鼻炎模型。HE染色观察鼻和肺组织的病理学改变；免疫组化检测鼻和肺组织中IL-5和IFN-γ的表达；以酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(bronchial alveolus lavage fluid，BALF)中IL-5和IFN-γ的水平。
　　 结果：
　　 1.变应性鼻炎大鼠模型组鼻和肺组织有明显炎症细胞浸润。
　　 2.模型组鼻和肺组织IL-5的表达明显高于对照组，并且和嗜酸性粒细胞的数量呈正相关。模型组鼻和肺组织IFN-γ的表达低于对照组。
　　 3.模型组BALF中IL-5的含量高于对照组，而IFN-γ的含量低于对照组.
　　 结论：
　　 变应性鼻炎大鼠上、下气道存在Th1和Th2的失衡、Th2优势表达；上、下气道炎症反应具有一致性和相关性。
　　 第二部分：
　　 目的：
　　 观察结核杆菌培养滤液蛋白(Mycobacterium tuberculosis culture filtrate protein，CFP) 对变应性鼻炎大鼠气道炎症反应及IFN-γ和IL-5表达的影响。
　　 方法：
　　 雄性SD(SPF级)大鼠随机分为5组：正常对照组、模型组、CFP治疗组、布地奈德治疗组、CFP对照组，每组10只。以卵蛋白为致敏原建立变应性鼻炎大鼠模型，CFP经鼻腔给药干预，观察大鼠鼻塞、打喷嚏、抓鼻等鼻部症状，HE染色观察鼻粘膜、肺组织的病理学改变；免疫组化检测鼻粘膜、肺组织中白细胞介素5(interleukin-5，IL-5)和干扰素γ（IFN-γ）的表达水平；以酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immuno-sorbent assay，ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(bronchial alveolus lavage fluid，BALF)中IL-5、IFN-γ的水平。
　　 结果：
　　 1. 大鼠变应性鼻炎模型成功建立；
　　 2. CFP可明显改善变应性鼻炎的鼻部症状，减轻鼻粘膜、肺组织的炎症反应，使Th1类细胞因子IFN-γ水平升高，Th2类细胞因子IL-5水平下降.
　　 结论：
　　 CFP作为一种免疫调节剂，能有效增加变应性鼻炎大鼠上下气道IFN-γ的表达和减少IL-5的表达，提示CFP可能对纠正变应性气道炎症Th1和Th2的失衡有作用，对防治变应性气道炎症具有潜在的应用前景。