SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架的体外和动物实验研究

摘要

冠心病是威胁人类生命健康的重大疾病之一，主要的治疗方式为：药治疗法、外科手术法、介入治疗方法。其中，介入治疗法广泛用于临床治疗中，介入治疗中95％都需要植入支架。药物支架的发展降低了再狭窄率（ISR）但没有完全消除，且药物支架在降低支架内再狭窄的同时可能引起晚期和极晚期血栓。如何实现快速内皮化和降低血栓发生率是药物洗脱支架目前面临的两大挑战。
　　SZ-21是血小板糖膜蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂，能作用于血小板血栓形成的最终环节，特异性地阻断血小板的聚集。VEGF是能特异的作用于血管内皮细胞的生长因子，具有促血管生成等活性。RAPA是美国FDA批准的用于药物洗脱支架上的抗增殖药物，因其抗增殖作用强而广泛运用。SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架将三者巧妙的结合在一起，以期达到抗再狭窄、快速内化和抗晚期血栓形成的的效果。
　　本文利用SZ-21/VEGF/RAPA药物涂层和药物洗脱支架，研究其对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）和血管平滑肌细胞（SMCs）的细胞行为和功能的影响，分析其血液相容性和抗炎能力，进一步植入新西兰大白兔进行在体实验。主要的研究内容和结论如下：
　　①SZ-21/VEGF/RAPA药物涂层对HUVECs的影响。研究表明该涂层能够促进HUVECs增殖、粘附和迁移；ELISA实验检测HUVECs eNOS和ET-1的释放量证实该涂层能够促进eNOS的释放、抑制ET-1的释放。
　　②SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架对 SMCs的影响。研究表明该涂层能够抑制 SMCs增殖、粘附和迁移，生长在该涂层表面的 SMCs形态发生变化，长梭形减少三角形和卵圆形增多。
　　③SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架的血液相容性检测。研究表明该涂层能够降低溶血率、抑制血小板的粘附和聚集，使 APTT、PT、TT时间延长，且Fbg含量显著降低。
　　④SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架抗炎能力评估。研究表明该涂层能够减少大鼠巨噬细胞的粘附并降低IL-1β、IL-6的释放量。
　　⑤SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架的新西兰大白兔在体实验。将SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架植入新西兰大白兔颈动脉，1周、4周和12周对支架植入段、近远心端、主要脏器组织进行扫描电镜、组织切片、免疫组化观察，并对静脉血进行血液生化指标检测，结果表明该支架安全且能有效抑制支架段再狭窄、防止血栓形成和促进支架快速内皮化。

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主要缩略词表

1 前 言

1.1 冠状动脉疾病现状

1.2 药物洗脱支架研究现状

1.3 VEGF的研究现状

1.4 SZ-21抗血栓形成机理

1.5 RAPA研究现状

1.6 临床前动物实验

1.7 研究内容、意义及技术路线

2 SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架对内皮细胞的影响

2.1 引言

2.2 实验试剂、仪器

2.3 实验方法

2.4 实验结果与分析

2.5 讨论

3 SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架对平滑肌细胞的影响

3.1 前言

3.2 实验试剂及仪器

3.3 实验方法

3.4 结果分析

3.5 讨论

4 SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架血液相容性

4.1 前言

4.2 实验材料和试剂

4.3 试验方法

4.4 实验结果

4.5 讨论

5 SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架的抗炎能力评估

5.1 引言

5.2 实验材料、试剂和主要仪器

5.3 试验方法

5.4 实验结果及分析

5.5 讨论

6 SZ-21/VEGF/RAPA药物洗脱支架的动物实验

6.1 前言

6.2 实验材料、试剂及主要仪器

6.2.3 实验主要仪器

6.4 实验方法

6.5 实验结果分析

6.6 讨论

7 结论及后续工作建议

7.1 主要结论

7.2 存在的不足和后续工作建议

致谢

参考文献

附录

A. 作者攻读硕士期间的科研成果:

B. 作者攻读硕士学位期间参与的科研项目: