益肾汤对糖尿病大鼠肾组织NF-κB表达的影响

摘要

目的：用链脲佐菌素腹腔注射（Streptozocin，STZ）诱发、建立糖尿病（Diabetes Mellitus，DM）大鼠模型；观察中药复方益肾汤对实验性DM大鼠肾脏的保护作用及对核转录因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）表达的影响，并以血管紧张素Ⅱ受体阻断剂（Angiotensin receptor blocker，ARB）缬纱坦作为对照，探讨益肾汤保护糖尿病肾病（Diabetic nephropathy，DN）的作用机制。
　　方法：成年雄性SD大鼠41只，随机分成正常对照组（control group，CON）、DM未治疗组（DMN）、DM缬纱坦治疗组（VST）、DM益肾汤治疗组（YST）4组。DM建模组大鼠于空腹状态一次性腹腔内注射2％STZ诱发DM模型；72小时后测定血糖，如血糖﹥16.7mmol/L，并稳定2-3天即算建模成功。VST组给予20mg/公斤体重/天缬纱坦灌胃；YST组给予相当于生药6.5g/公斤体重/天的浓缩药液灌胃；CON及DMN组按相当剂量饮用水灌胃。实验开始前3周每周测量大鼠体重，后5周每天测量体重，根据体重调整灌胃剂量。8周后，空腹测定每只大鼠体重；留取24小时尿液，记尿量，以特异性放射免疫法测定尿白蛋白含量，并计算尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rates,UAER)；以10%水合氯醛麻醉处死大鼠，取血测定血糖、血肌酐、血尿素氮等指标；取左肾经生理盐水洗涤并擦干后称重；取右肾纵形切开一半以10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，制作切片进行免疫组化检测肾组织 NF-κB的表达、分布，并利用图像分析系统进行定量分析。
　　结果：DM造模组大鼠成功诱发DM造模成功。YST、VST、DMN及CON组血糖分别为(34.3±9.7)mmol/L,(29.8±11.6) mmol/L,(38.3±6.9) mmol/L,(13.0±2.9) mmol/L,组间比较具有统计学差异（p<0.01）；YST、VST、DMN组间比较无统计学差异。YST、VST、DMN及CON组的肾脏肥大指数（肾重/体重，mg/g）分别为4.8±0.9、4.7±1.0、5.3±0.8、3.5±0.6，组间比较具有统计学差异（p=0.003），但YST、VST与DMN组间比较无统计学差异。YST、VST、DMN及CON组的UAER分别为192±88、188±88、319±62、24±8（ng/min），组间比较有统计学差异（p<0.01）；YST、VST及 DMN组间比较亦具统计学差异（p<0.05）；YST与 VST组间比较无统计学差异（p>0.05）。显微镜下图像分析显示，YST、VST、DMN及CON组大鼠肾脏NF-κB表达量（累积光密度）分别是5.08±0.18,5.11±0.12，5.47±0.12，4.5±0.33，组间比较具有统计学差异（p<0.001）；YST、VST及 DMN组间比较亦有统计学差异（p<0.05）；YST与VST组间比较无统计学差异。NF-κB表达量与肾脏肥大指数（r=0.6，p=0.002）、空腹血糖（r=0.67，p<0.001）、UAER（r=0.76，p<0.001）呈显著正相关。各组大鼠实验前后的体重、血肌酐、尿素氮比较均无统计学差异。
　　结论：DM大鼠成模8周时已出现明显肾功能改变。“益肾汤”具有减少DM大鼠UAER、抑制肾脏NF-κB的表达的作用。“益肾汤”减少DM大鼠UAER、抑制肾脏NF-κB表达的作用与缬沙坦相仿。“益肾汤”防治DN的作用与其减少肾脏NF-κB表达有关。

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缩略词表

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英文摘要

前言

研究目的

材料与方法

一、 实验材料

二、实验方法

结 果

一、一般观察：

二、各组大鼠体重、

三、各组大鼠24h尿总蛋白、UAER、NF-κB表达量（累积光密度）变化：

四、相关分析

讨论

一、DM和DN动物模型

二、NF-κB对肾脏肥大、UAER的影响

三、ARB对NF-κB的作用

四、益肾汤对NF-κB的作用

结论

参考文献

附录

综 述

致谢

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