高浓度大蒜油注射液的制备及安全性初步评价

摘要

大蒜为百合科葱属植物生蒜Allium sativum L.的鳞茎，大蒜油是粉碎后的大蒜泥经水蒸一馏或有机溶剂萃取而得到的挥发油。大蒜油具有抗菌消炎，防癌抗癌，预防与治疗心血管疾病，保护肝脏，提高机体免疫力以及抗衰老等功效。目前，国内外报道有关大蒜的制剂主要有美国的大蒜油胶丸、日本的大蒜锭，德国和匈牙利的大蒜油β-环糊精包结的糖衣小丸，还有脱水大蒜粉、大蒜片，我国的大蒜油软胶囊、大蒜油微胶囊、大蒜素(DATS，二烯丙基三硫醚)注射液和大蒜油亚微乳。其中DATS为人工合成的单一成分，所制备的注射液分别于2004年及2005年从地方标准升为国家标准：大蒜油亚微乳注射液，虽然其研究已有成效，但离生产及应用相距甚远。 由于大蒜油难溶于水，在现有制剂中以粉剂、丸剂、片剂、胶囊剂为主，在很大程度上局限了给药途径。为了取得快速而稳定的疗效，临床上常常希望将大蒜油制成注射液肌内注射或静脉注射给药。传统的大蒜油注射液常用吐温-80增溶，而近年来吐温-80的溶血反应时有发现而被限用或禁用。本文选用羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)包合大蒜油制备注射液，旨在提高大蒜油注射液中大蒜油浓度，提高大蒜油的稳定性，降低大蒜油的刺激性及毒副作用，为临床提供安全高效的高浓度大蒜油注射液。主要研究内容如下： 高浓度大蒜油注射液中大蒜油含量测定方法的建立：HPLC法。采用Hypersil BDS-C18(200×0.46 mm，5μm，大连依立特)色谱柱，流动相为乙腈-水(62：38，v/v)，柱温35℃，流速1.2 mL/min，紫外检测器，检测波长220 nm。该方法检测样品在1.4929～0.0149 mg/mL范围内线性良好，精密度、回收率和重复性均符合相关规定。 高浓度大蒜油注射液的制备及稳定性初步评价：通过正交试验，对高浓度大蒜油注射液的制备工艺进行了筛选，确定了研磨法及制备工艺最佳条件：大蒜油与环糊精的用量比为1： 10，研磨时间为1.5 h，制备温度为30℃，pH值为8.5，所制备的高浓度大蒜油注射液外观性状呈淡黄色至黄色澄明液体，pH值为8.5，规格为1 mL胜射液含大蒜油30.0 mg。高浓度大蒜油注射液稳定性考察：以初匀速法设计，HPLC测定注射液中大蒜油含量，其有效期为1.78年，基本可以满足临床应用需要；高浓度大蒜油注射液对光热敏感，故应在适宜温度下避光贮存：加速试验及长期留样试验6个月后表明，高浓度大蒜油注射液的性状、pH值、含量等指标未发生明显变化。高浓度大蒜油注射液安全性初步评价：采用改良Karber法测定小鼠LD50；以剂量递增法测定小鼠蓄积性和耐受性；分别以剂量181、73、36 mg/Kg为3个试验组，设阴性和阳性对照组进行小鼠骨髓微核试验；分别以剂量250、125、63 mg/Kg为3个剂量组，设阴性和阳性对照组进行小鼠精子畸形试验；用2％红细胞混悬液进行溶血性试验；肌内注射高浓度大蒜油注射液后进行病理切片，观察其刺激性。结果表明，小鼠肌内注射高浓度大蒜油注射液，LD50为362.5mg/kg(以大蒜油计)，其95％可信限范围为314.3～418.0mg/kg：蓄积系数大于5.3，无显著积毒性和耐受性(P＞0.05)，小鼠骨髓微核试验和精子畸形试验结果均为阴性，无溶血性，无刺激性。表明高浓度大蒜油注射液安全可靠，可用于肌内注射。 高浓度大蒜油注射液质量标准研究：建立了高浓度大蒜油注射液的质量标准，经过多次复核检验，能够有效控制该制剂的质量，为工业化生产和临床应用奠定了基础。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1章文献综述

1.1大蒜油的性质与成分

1.2大蒜油的药理作用

1.3大蒜油提取工艺研究进展

1.4大蒜油制剂研究现状

1.5高浓度大蒜油注射液研制的必要性及其意义

1.6羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)的特点

第2章引言

第3章高浓度大蒜油注射液中大蒜油含量测定方法的建立

3.1材料

3.2方法

3.3结果

3.4讨论

3.5小结

第4章高浓度大蒜油注射液的制备及其稳定性初步评价

4.1材料

4.2方法

4.3结果

4.4讨论

4.5小结

第5章高浓度大蒜油注射液安全性初步评价

5.1材料

5.2方法

5.3结果

5.4讨论

5.5小结

第6章高浓度大蒜油注射液的质量标准

全文总结

参考文献

致谢

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