湖北百合组织培养与快繁技术研究

摘要

本试验以湖北百合(Lilium henryi Baker)的鳞叶、叶片、花器官、无菌苗叶片和再生小鳞茎的鳞叶为外植体，接种在附加不同浓度及组合的6—BA、NAA、KT、IAA的培养基中进行离体培养，通过愈伤组织和不定芽诱导途径，研究了影响湖北百合组培快繁的主要因子，着重探索了湖北百合组织培养的最佳外植体材料、培养基种类和培养方法，以期获得湖北百合组织培养的一套完整再生体系。结果表明： 1．湖北百合的鳞叶、叶片的污染率较高，出愈率很低；花器官中的子房、花托诱导分化率高，不定芽数量多，从诱导时间和芽的生长状况花托好于子房，其它花器官部位死亡率较高；无菌苗叶片、再生小鳞茎的鳞叶无污染，数量多，基数大，增值快，且一次成苗。因此花托、无菌苗叶片和再生小鳞茎的鳞叶为湖北百合的最佳组织培养外植体。 2．花托的最佳诱导分化培养基为MS+6—BA2.0(单位mg/L，下同)+NAA0.2，此时分化率为96.67％，分化系数为3.1。无菌苗的最佳诱导分化培养基为MS+6—BA0.5+NAA0.5，分化率为66.67％，芽分化系数为2.0，此时产生的愈伤组织较多，芽也健壮，根较少。以再生小鳞茎的鳞叶为外植体，最佳诱导培养基为6—BA0.5+NAA1.0+KT0.2，分化率为100.00％，芽分化系数3.8，小芽成苗快，生长健壮。 3．增殖培养阶段，以MS+6—BA1.0+NAA0.05作为增殖培养基最好，增殖系数为3.2，愈伤组织较多，继续分化不定芽的潜力大，苗高均匀，球茎膨大也显著。 4．降低大量元素的浓度有利于湖北百合的生根，其中较适浓度为1/2MS；NAA对生根促进作用较LAA好，最佳浓度为0.3mg/L；最佳的生根糖浓度为60mg/L；活性炭对湖北百合根的伸长起促进作用；0.5mg/L的多效唑起到矮化植株的作用，生根率为100％，平均根数6.6，此时叶片肥厚，深绿色，多2片，为后期的无菌苗移栽成活率提供了保障。综合各项因素，最佳的生根培养基为1/2MS+NAA0.3+0.5mg/L，PP333+60g/L糖。 5．糖和矮壮素对湖北百合球茎的膨大有影响。MS+6—BA1.0+NAA0.05的培养基中附加3.0mg/L的矮壮素，对湖北百合小鳞茎的膨大具有显著效果，平均鳞茎增重182mg。30～80g/L，的糖浓度，对小鳞茎增重有较好的作用，此范围内小鳞茎直径、增重量会随糖浓度的增大而增大。糖浓度较高，湖北百合试管苗生长不良，因此，80g/L糖浓度更有利于湖北百合鳞茎的膨大。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

第一章文献综述

1.1 百合的品种特性及分类

1.1.1百合的品种特性

1.1.2百合的分类

1.2我国百合的种质资源和利用情况

1.2.1我国百合的种质资源

1.2.2我国百合的利用情况

1.3百合的经济价值和用途

1.4国内外百合属植物组织培养的研究进展

1.4.1研究简史

1.4.2研究的主要内容

第二章 引言

2.1湖北百合的特性及研究现状

2.2本实验研究的目的及意义

第三章材料与方法

3.1材料

3.1.1植物材料

3.1.2主要试剂

3.2方法

3.2.1培养条件

3.2.2外植体的消毒与培养

3.2.3不定芽增殖培养

3.2.4无菌苗的生根培养

3.2.5小鳞茎的膨大培养

3.2.6炼苗与移栽

3.3试验结果的观察与统计

第四章结果与分析

4.1无性系的建立

4.1.1鳞叶无性系的建立

4.1.2实生苗叶片无性系的建立

4.1.3花器官无性系的建立

4.1.4无菌苗叶片无性系的建立

4.1.5再生小鳞茎的鳞叶无性系的建立

4.2不定芽增殖培养

4.3生根培养

4.3.1不同无机盐离子浓度对湖北百合生根的影响

4.3.2 NAA与IAA对湖北百合生根的影响

4.3.3糖浓度对湖北百合生根的影响

4.3.4活性炭(AC)对湖北百合生根的影响

4.3.5多效唑(PP333)对湖北百合生根壮苗的影响

4.4小鳞茎的膨大培养

4.4.1矮壮素(CCC)对鳞茎的膨大影响

4.4.2糖浓度对鳞茎膨大的影响

4.5组培苗的炼苗和移栽

第五章讨论

5.1外植体的筛选

5.2培养基的影响

5.3植物生长调节剂的影响

5.4不同因素对湖北百合试管苗生根壮苗的影响

5.5矮壮素和糖浓度对湖北百合鳞茎膨大的影响

第六章小结

第七章后续研究内容

参考文献

附图

致谢

在学期间发表的文章