混合造血干细胞移植治疗鼠系统性红斑狼疮的实验研究

摘要

【目的】
　　 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种严重威胁人类健康与生命的自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AD)。目前,造血干细胞移植(hematopoietie stem cell transplatation,HSCT)逐渐成为治疗严重自身免疫病的有效方法之一。造血干细胞移植分为同种自体和异体造血干细胞移植。自体造血干细胞移植治疗SLE的方法,虽然短期缓解率尚可,但由于其自身的缺点,远期复发率极高,因而临床应用前景受限。异体造血干细胞移植,理论上可根治SLE,但存在配型困难,更为棘手的是难治性排斥反应,表现为移植物抗宿主病(GVHD)或宿主抗移植物病(HVGD)。经过近年来的不断探索,特别是细胞免疫学和分子生物学的研究进展,提示采用同基因和异基因造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)混合移植有可能在重建免疫的同时诱导免疫耐受,从而避免或减轻排斥反应。本研究拟探讨纯化同基因和异基因混合造血干细胞移植对排斥反应的防治作用以及治疗狼疮鼠的效果。
　　 【方法】
　　 36只MRL/lpr小鼠随机分为同基因与异基因比例为1:5、1:10、1:15、异基因移植组,药物组及对照组共六组,每组6只。各移植组受体鼠经钴60γ线1.25放射源照射预处理。采集BALB/c小鼠与供体狼疮鼠骨髓细胞,经lin-CD117+免疫磁珠法分选出小鼠的造血干细胞,按不同比例混合后,尾静脉注射到各移植组受体MRL/lpr小鼠。药物组未经照射预处理,每天腹腔注射地塞米松Img/kg·d。未经任何处理的狼疮鼠作为空白对照组。定性、定量分析小鼠尿蚩白。外周血白细胞、肌酐、尿素氮等检测。ELISA检测小鼠抗核抗体。肾组织病理切片,光镜、电镜、免疫荧光检测MRL/lpr小鼠的肾脏病理变化。观察小鼠的一般情况,移植相关的并发症,死亡率。
　　 【结果】
　　 对照组尿蛋白定性平均在+++-++++,各移植组和药物组平均++左右。尿微量白蛋白在移植后4周降低,在移植后8周明显减低。各移植组可在短时间内获得造血重建。肾组织病理结果显示,对照组肾小球新月体和(或)硬化改变重于药物组和移植组,差异有显著性(P＜0.05),药物组病变较各移植组无显著差异(P＞0.05),但体重下降、死亡率高于移植组。
　　 【结论】
　　 用混合造血干细胞治疗狼疮鼠,可以有效纠正和控制狼疮鼠的大量蛋白尿,改善狼疮鼠肾脏病变,与移植相关的并发症、死亡发生率不高,是一种较安全、有效的治疗狼疮鼠病变的方法。