耐氟康唑白念珠菌的CDR1基因突变及其春表达研究

摘要

[目的]
　　 1.了解广州市念珠菌性阴道炎患者中白念珠菌分离株对氟康唑的耐药情况。
　　 2.观察耐氟康唑白念珠菌的CDR1基因突变及其表达，探讨CDR1基因在氟康唑耐药机制中的作用。
　　 [方法]
　　 1.收集328例白念珠菌性阴道炎病例，用酵母菌微量稀释法检测分离菌株及标准菌株对氟康唑的敏感性。
　　 2.取氟康唑敏感、耐药白念珠菌各30株，PCR扩增CDR1基因，比较耐药株与敏感株CDR1基因序列的差异。
　　 3.取氟康唑耐药白念珠菌6株和标准菌种1株，用荧光定量PCR检测CDR1 mRNA，比较耐药株与标准株之间的表达差异。
　　 [结果]
　　 1.328例临床分离菌株中，敏感、中度敏感和耐药者各有274株(83.8％)、16株(4.6％)、38株(11.6％)。
　　 2.在氟康唑耐药菌株中，12株在第2832位碱基胞嘧啶(C)→胸腺嘧啶(T)，编码氨基酸均为天冬氨酸，为同义突变；其中8株在第2746位碱基腺嘌呤(A)→鸟嘌呤(G)，使第916位氨基酸由异亮氨酸变为缬氨酸(I916V)，该位点在CDR1基因中位于SSF52540及PTHR19241，属于ATP结合盒区。氟康唑敏感菌株未见CDR1基因突变，二者的差异有统计学意义(P<0.01)。
　　 3.耐氟康唑白念珠菌的CDR1 mRNA表达为标准菌株的1.55倍，差异有统计学意义(P<0.05)。
　　 [结论]
　　 1.广州市念珠菌性阴道炎患者中白念珠菌耐药情况较严重。
　　 2.在耐氟康唑白念珠菌分离菌株中存在CDR1基因突变位点，I916V为首次发现的突变位点。
　　 3.CDR1 mRNA表达增高可能是白念珠菌对氟康唑的耐药机制之一。