Vγ9Vδ2T细胞及其趋化因子受体CCR2、CCR5、CXCR3在结核性胸腔积液中的作用机制研究

摘要

[目的]
　　 本课题通过检测结核性胸腔积液患者血液及胸腔积液中单核细胞趋化蛋白-1(CCL2)、γ干扰素诱导蛋白10(CXCL10)的含量，并检测CCL2、CCL5、CXCL10 mRNA的相对表达量，及CCL2的受体CCR2、CCL5的受体CCR5、CXCL10的受体CXCR3在Vγ9Vδ2T细胞表面所占比例，探讨Vγ9Vδ2T细胞与趋化因子、趋化因子受体在结核性胸腔积液的作用及机制。
　　 [方法]
　　 1、实验分组:将健康人作为正常组;结核性胸腔积液患者作为结核组。
　　 2、采用ELISA方法检测血液及胸腔积液中CCL2、CXCL10的含量。
　　 3、采用实时荧光定量PCR方法分别检测胸腔积液及血液单个核细胞CCL2、CCL5、CXCL10的mRNA相对表达量。
　　 4、采用流式细胞技术检测胸腔积液及血液的Vγ9Vδ2T细胞表面CCR2、CCR5、CXCR3的表达。
　　 5、实验数据以Excel软件建立数据库，实验结果采用SPSS17.0统计学软件进行统计分析。各组数据以均数±标准差表示，偏态分布资料以中位数（下四分位数～上四分位数）表示。两组样本比较采用独立样本f检验，配对样本比较采用配对样本f检验;偏态分布采用非参数检验;比较CCL2、CXCL10与Vγ9Vδ2T细胞数量的相关性采用Spearman等级相关分析。P＜0.05差异有统计学意义。
　　 [结果]
　　 1、结核组血清中CXCL10含量明显高于正常组(P＜0.05);结核组胸腔积液中CXCL10含量高于组内血清（P＜0.05）。
　　 2、结核组血清中CCL2含量高于正常组(P＜0.05)。结核组胸腔积液中CCL2含量高于组内血清(P＜0.05)。
　　 3、结核组血液中单个核细胞CCL2的mRNA相对表达量高于正常组(P＜0.05)，结核组胸腔积液中单个核细胞CCL2的mRNA相对表达量高于组内血液(P＜0.05)。
　　 4、结核组血液中单个核细胞CCL5的mRNA相对表达量与正常组比较无明显差异。
　　 5、两组血液中Vγ9Vδ2T细胞表面CCR2、CXCR3、CCR5的表达无显著性差异;结核组胸腔积液中Vγ9Vδ2T细胞表面的CCR2高于组内血液(P＜0.05)。
　　 6、结核组血清中，CCL2的含量与血液中Vγ9Vδ2T细胞数量呈中度正相关（P＜0.05），CXCL10的含量与Vγ9Vδ2T细胞数量呈高度正相关(P＜0.05);结核组胸腔积液中，CCL2的含量与Vγ9Vδ2T细胞数量呈高度正相关(P＜0.05)，CXCL10的含量与Vγ9Vδ2T细胞数量呈高度正相关(P＜0.05)。
　　 [结论]
　　 1、结核组血清中CCL2、CXCL10含量均明显高于正常组(P＜0.05)，对诊断有一定的参考意义。结核组胸腔积液中CCL2、CXCL10含量均高于组内血清含量(P＜0.05)，提示CCL2、CXCL10不仅有从血浆扩散入胸膜腔的途径，还有可能由胸膜腔局部的胸膜间皮细胞或浸润到胸腔积液的炎性细胞产生。
　　 2、结核组胸腔积液中Vγ9Vδ2T细胞数量高于组内血液，及CCL2、CXCL10含量与Vγ9Vδ2T细胞数量的相关性，提示CCL2/CCR2的相互作用、CXCL10对Vγ9Vδ2T细胞增殖、迁移等活动有密切关系。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 材料与方法

2．1 研究对象

2．2 结核组入选标准

2．3 主要实验试剂

2．4 实验方法

2．5 统计学方法

3 结果

3．1 CXCL10的检测结果

3．2 CCL2的检测结果

3．3 CCL2、CCL5及CXCL10 mRNA相对表达量结果

3．4 流式检测结果

4 讨论

4．1 CCL2及受体CCR2与Vγ9Vδ2T细胞

4．2 CCL5及受体CCR5与Vγ9Vδ2T细胞

4．3 CXCL10及受体CXCR3与Vγ9Vδ2T细胞

5 结论

参考文献

文献综述 γδT细胞及其表达的趋化因子受体在疾病中的功能研究进展

致谢

附录一 英汉双解缩略词表

附录二：攻读学位期间发表文章情况