酵母SRO9基因参与氧化应激和内质网应激反应机制的初步研究

摘要

目的：酿酒酵母目前是被人们研究最多的生物之一，它与动物和植物细胞具有很多相同的结构，易于培养，因此是理想的真核模式生物。Sro9p是一种细胞质RNA结合蛋白，与核糖体翻译相关，同时参与调节肌动蛋白微丝的组装。本研究在构建SRO9基因缺失和过表达酵母菌株的基础上，研究SRO9参与酵母复制寿命、氧化应激和内质网应激反应的分子机制。 方法：利用同源重组的方法构建SRO9单基因缺失和过表达菌株，检测酵母菌株的复制寿命;检测酵母细胞在强氧化剂或内质网应激诱导剂处理时的菌落形成能力;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测参与酵母氧化应激和内质网应激反应相关基因的表达;同时检测参与氧化应激相关酶的活性。 结果：⑴SRO9基因缺失菌株复制寿命缩短，SRO9基因过表达菌株复制寿命无明显变化。⑵SRO9基因缺失菌株抗氧化能力减弱，细胞内SOD1、SOD2转录水平降低，总SOD酶活性降低，H2O2含量和ROS水平下降，过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性无明显变化。⑶SRO9基因缺失菌株对内质网应激诱导剂衣霉素的抗性增加，参与内质网应激反应的下游调节基因INO1和PDI的mRNA水平升高。 结论：SRO9基因参与调控酿酒酵母的复制寿命、氧化应激和内质网应激反应。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 酿酒酵母SRO9基因缺失和过表达菌株的构建

2．1 材料与方法

2．2 结果

2．3 讨论

3 SRO9基因对酵母菌株复制寿命的影响

3．1 材料与方法

3．2 结果

3．3 讨论

4 SRO9基因缺失对酵母菌株氧化应激能力的影响

4．1 材料与方法

4．2 结果

4．3 讨论

5 SRO9基因缺失对酵母菌株内质网应激能力的影响

5．1 材料与方法

5．2 结果

5．3 讨论

6 全文小结

参考文献

综述 活性氧与衰老的研究进展

致谢

附录一 缩写词中英文对照

附录二 在读硕士期间的科研情况