miR-29a和miR-335-5p在骨关节炎患者外周血单个核细胞及关节液中的表达及其意义研究

摘要

目的: 验证miR-29a和miR-335-5p在OA患者的外周血单个核细胞及关节液中的表达是否有异常，探讨这种异常是否与OA的严重程度相关。 方法: 选取OA患者50例及健康志愿者30例，收集外周抗凝血分离出外周血单个核细胞，实时定量PCR检测miR-29a、miR-335-5p的mRNA水平。抽取20例OA患者和20例非OA患者膝关节的关节液，离心后分离出上清液，实时定量PCR检测miR-29a、miR-335-5p的mRNA水平。分析OA患者和对照组的指标之间表达有没有差异，探讨其相互关系。对OA患者进行Kellgren-Lawrence X线分级，并分析miR-29a和miR-335-5p与OA患者年龄、体重和Kellgren-Lawrence X线分级之间的相互关系。 结果: 1. OA患者外周血单个核细胞中，miR-29a的表达高于健康对照组[（4.48±2.44）VS（7.40±4.10），P＜0.05]，差异有统计学意义；miR-335-5p的表达低于健康对照组[（10.12±3.51）VS（8.49±2.54），P＜0.05]，差异有统计学意义。 2. OA患者关节液中，miR-29a的表达高于非 OA组[（4.90±2.33） VS（7.55±2.79），P＜0.05]，差异有统计学意义；miR-335-5p的表达低于非OA组[（9.78±2.50）VS（8.23±2.13），P＜0.05]，差异有统计学意义。 3. OA患者miR-29a在外周血单个核细胞中相对表达量与年龄、体重指数(BMI)、Kellgren-LawrenceX线分级呈正相关(r=0.896，P<0.001； r=0.880，P<0.001；r=0.357，P=0.005)；OA患者miR-335-5p在外周血单个核细胞中相对表达量与年龄、体重指数(BMI)呈负相关(r=-0.763，P<0.001；r=-0.440，P<0.001)，与Kellgren-Lawrence的X线分级无明显相关性（r=-0.311，P=0.071）。 结论: miR-29a在OA患者外周血单个核细胞、关节液中高表达，与患者年龄、体重指数及Kellgren-LawrenceX线分级正相关，miR-335-5p在OA患者外周血单个核细胞、关节液中低表达，与患者年龄、体重指数负相关，与Kellgren-LawrenceX线分级无明显相关性；考虑miR-29a、miR-335-5p参与OA的发病，miR-29a可能在OA骨赘形成中起促进作用。

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1 前言

1.1 研究背景

1.2 研究目的

1.3 研究内容

2 实验材料与方法

2.1 实验对象及标本

2.2 试剂与仪器

2.3 实验方法

3 结果

3.1 实验中使用的引物序列

3.2 OA组和健康对照组一般情况比较

3.3 miR-29a、miR-335-5p在OA组和健康对照组外周血单个核细胞中的表达

3.4 miR-29a、miR-335-5p在OA组和非OA组关节液中的表达

3.5 相关性分析

4 讨论

5 小结

参考文献

综述:MicroRNA-146的靶基因及其参与的信号通路与骨性关节炎

致谢

附录一实验技术路线简图

附表二缩写词表

附表三在读硕士期间的科研情况