辛伐他汀对猪脊髓缺血再灌注损伤后热休克蛋白70表达的影响

摘要

目的： 观察经猪副半奇静脉逆行灌注辛伐他汀对猪脊髓缺血再灌注损伤的保护效果，并通过分析脊髓组织中热休克蛋白70(Heat shock protein70，Hsp70)的表达变化来探讨其可能的机制。 方法： 将24只健康成年的西藏小型猪，雌雄不拘，体重（25±3）kg，随机分为3组：假手术组（C组）、缺血再灌注损伤组（I/R组）和辛伐他汀实验组（Sim组），每组8只。C组：仅仅游离胸主动脉、锁骨下动脉及副半奇静脉；I/R组：游离胸主动脉、锁骨下动脉，采用胸主动脉、锁骨下动脉阻断法制备脊髓缺血再灌注损伤模型，阻断时间为70 min，并于阻断前游离副半奇静脉，远端结扎，近端插管，阻断过程中经副半奇静脉逆行灌注1000 mL乳酸林格钠液，灌注流速为14.34 mL/min；Sim组：缺血再灌注损伤的模型制备及副半奇静脉的游离同I/R组，阻断过程中经副半奇静脉逆行灌注1000 mL辛伐他汀溶液（0.25 mg/kg），灌注流速为14.34 mL/min，并于术后立即管饲辛伐他汀片剂80 mg/d,共30 d。各组于术中监测动脉压、血气分析及鼻咽温的变化。于术后6 h、24 h、48 h进行神经功能评分，术后30 d取L2～L4及骶段脊髓，采用苏木素-伊红染色（HE）、甲酚子染色（NISSLE）观察脊髓组织标本中神经元形态学变化，采用免疫组织化学法检测Hsp70的表达变化。 结果： 24只西藏小型猪全部存活。术后6 h，I/R组与Sim组神经功能评分均较低，差异无统计学意义；术后24 h，Sim组评分（3.2±0.3）高于I/R组（2.2±0.4），差异有统计学意义（P<0.05）；术后48 h，Sim组评分（3.6±0.2）高于I/R组（2.8±0.4），差异有统计学意义（P<0.05），神经功能评分随着再灌注时间的延长而逐渐增加。HE、NISSLE染色显示：与假手术组比较，I/R组和Sim组，神经元细胞均有不同程度的损伤；但与I/R组比较，Sim组神经元细胞核溶解程度较轻，神经元结构相对完整，存活数量也较多。免疫组织化学法检测热休克蛋白70表达的平均积分光密度(Mean density)分别为：C组0.35±0.01；I/R组0.27±0.01，Sim组0.45±0.01，其在Sim组表达水平明显高于I/R组，差异有统计学意义（P<0.01）。 结论： 辛伐他汀经猪副半奇静脉逆行灌注对猪脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用，其机制可能与辛伐他汀可上调热休克蛋白70的表达有关。