内源性哇巴因与精子质量相关参数间关系的初步探讨

摘要

目的： 1.探究不同精子前向运动（PR）百分率的男性精液中内源性哇巴因(endogenous ouabain，EO)水平差异。 2.探究精浆 EO水平与精子形态学参数（包括精子正常形态率，头部、中部、尾部缺陷率，畸形精子指数、精子畸形指数等）、精子DNA碎片指数（Sperm DNA fragmentation index，DFI）之间相关性。 3.探究精液中 EO与精浆丙二醛水平（malondialdehyde，MDA）之间相关性，进一步探讨EO影响精子DNA完整性的机制。 方法： 1.研究对象的纳入：经佛山市第一人民医院生殖医学伦理委员会讨论同意后，选取2015年3月至5月间就诊于佛山市第一人民医院生殖医学中心男科门诊的患者，年龄23岁～40岁，共78例，排除近半年有高热史（Tmax＞38.5℃）的患者、精索静脉曲张、白细胞精液症、有下丘脑或肾上腺疾病、免疫系统疾病及染色体异常者； 2.精液标本的预处理：所有研究对象均禁欲2 d～7 d，采取手淫法将新鲜精液收集于消毒干燥杯内，通过称重记录精液量，然后放置于37℃恒温平板，等待20 min~60 min待精液完全液化后再行相关检测； 3.精液质量的相关参数检测：①参考《WHO人类精液检验与处理实验室手册》（第五版）的操作规定，采用计算机辅助精液分析仪检测精子的活动力和密度；②采用巴氏染色法对精子行形态学参数进行检测；③采用精子核染色质扩散实验检测精子的DNA完整性； 4.精浆 EO水平的检测：采用双抗体一步夹心法 ELISA试验检测精浆 EO水平。 5.精浆MDA水平检测：采用硫代巴比妥酸法检测精浆MDA水平。 结果： 1.不同精子PR百分率组的精浆EO水平比较 活动力正常组男性精浆中EO水平明显低于轻度弱精子症组（P＜0.01）、中度弱精子症组（P＜0.01）以及严重和极度弱精子症组（P＜0.01）；轻度、中度以及严重和极度弱精子症组之间精浆 EO水平的差异则无统计学意义。（P＞0.05） 2.对精浆EO与精子形态学参数进行相关性分析，结果显示：精浆EO水平与精子中部缺陷率、畸形精子指数、精子畸形指数呈正相关，相关系数分别为r=0.313（P＜0.05），r=0.303（P＜0.01），r=0.276（P＜0.05）。 3.对精浆中EO水平与精子DFI进行相关性分析，结果显示精浆EO水平与精子DFI呈显著正相关（r=0.388，P＜0.01）。 4.对 EO和 MDA在精浆中的水平进行相关性分析，结果显示精浆中 EO水平与MDA水平呈显著正相关（r=0.397，P＜0.01）。 结论： 1.精子PR百分率随精浆中EO水平上升呈持续下降趋势，EO可能是抑制精子前向运动的一个因素，并与弱精子发病有关； 2.精浆中 EO水平与精子尾部缺陷率、精子畸形指数、畸形精子指数呈显著正相关。EO可能造成精子尾部缺陷，从而使精子畸形指数和畸形精子指数上升； 3.精浆中EO水平提高可造成精液ROS水平升高，继而使精子DNA完整性下降，影响男性生育能力。

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1 前言

1.1 研究背景

1.2 研究目的

1.3 研究内容

2 内源性哇巴因对精子质量常规参数的影响

2.1第1节 内源性哇巴因对精子前向运动百分率的影响

2.2 第2节 内源性哇巴因对精子形态学参数的影响

3 精浆内源性哇巴因与精子DNA碎片指数关系的研究

3.1 第1节 精浆内源性哇巴因水平与精子DNA碎片指数的相关性

3.2 第2节 精浆内源性哇巴因水平与精浆丙二醛水平的相关性

4 结论

参考文献

综述:哇巴因在弱精子症中作用的研究进展

致谢

附录一： 缩写词中英文对照

附录二：在读期间的科研情况