细胞因子在天疱疮棘层松解和抗体产生中的作用

摘要

目的:天疱疮是一种自身抗体介导的器官特异性、自身免疫性大疱性皮肤病,以出现针对角质形成细胞表面桥粒成分的特异性IgG抗体引起棘层细胞松解为特征.近年研究发现天疱疮发病中同时存在细胞免疫和体液免疫紊乱,天疱疮患者皮损局部细胞因子水平增高,有明显的炎症细胞浸润.B细胞产生自身抗体需要HLA-Ⅱ限制性的CD4<'+>T细胞的辅助,局部浸润细胞分泌的细胞因子表型提示Th2细胞在天疱疮发病中起了重要作用.该实验借助体外建立的天疱疮器官模型,选取IL-2、IFN-γ(Th1型细胞因子)和IL-10(Th2型细胞因子)作为研究对象,观察它们在棘层松解和B细胞抗体产生中的作用,为深入研究细胞免疫在天疱疮发病中的作用及其生物学治疗奠定基础.方法:用硫酸铵盐析沉淀法和DEAE-32纤维素离子交换层析法纯化天疱疮患者血清,得到纯化的天疱疮抗体,加入正常人表皮片培养体系中,建立天疱疮体外器官培养模型.在此基础上,单独或共同加入不同浓度的IL-2、IFN-γ、IL-10,取培养24、48、72小时的皮片,组织病理H.E.当色观察棘层松解程度;分离正常人PBMC与纯化的天疱疮抗原EC1-2、EC4共同培养,同时加入不同浓度的IL-2、IFN-γ、IL-10,7天后取培养上清进行ELISPOT和间接ELISA法检测其中的天疱疮抗体量.

目录

英文缩写注释

细胞因子在天疱疮棘层松解和抗体产生中的作用

前 言

第一部分细胞因子在天疱疮棘层松解中的作用

一、材料

二、天疱疮抗体（Pab）的纯化

三、角质形成细胞培养

四、表皮片的培养及天疱疮体外器官培养模型的建立

结 果

讨 论

第二部分细胞因子在天疱疮自身抗体产生中的作用

一、材料

二、正常人外周血单个核细胞（PBMC）分离培养

三、不同浓度IL-2、IFN-γ和IL-10对B细胞产生天疱疮抗体影响作用的观察

四、统计学处理：

结 果

讨论

结论

致 谢

图 片

参考文献

文献综述天疱疮发病机制研究进展

参考文献

攻读硕士学位期间发表论文