基于因子分析的定经汤及其拆方调整卵巢早衰的生物学机制研究

摘要

目的:利用复合心理刺激法建立卵巢早衰大鼠模型,通过给予定经汤或其拆方药进行调整治疗观察药效,用因子分析对大鼠生殖内分泌指标进行内部分析,探讨定经汤及其拆方对卵巢早衰的调整机制。
　　方法:用声—光—电复合应激刺激法复制卵巢早衰大鼠模型。将大鼠分成正常组、模型组、全方组、主药对组、无主药对组、疏肝组和补肾组7组,除正常组外,对其他各组进行复合心理刺激造模,从造模的第一天开始,正常组和模型组灌胃生理盐水,定经汤各组灌胃相应的药物,实验20天后,在大鼠动情期取指标,检测血清中E2、P、FSH、LH、ACTH、CORT、NO和下丘脑匀浆液中GnRH、β-EP、IL-1、CRH、NOS、ER、PR以观察药效。利用因子分析方法探究各生物分子之间的相互调控关系,并探寻调整卵巢早衰过程中的关键生物分子。
　　结果:通过观察大鼠的体征,动情周期,脏器的重量和组织形态学变化,模型组与正常组差异明显;检测与卵巢早衰相关的生物指标E2、P、FSH、LH、ACTH、CORT、GnRH、β-EP、IL-1、CRH,模型组与正常组差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。
　　通过给予中药复方干预治疗,与卵巢早衰模型组比较,全方组明显提高E2、LH、NO、GnRH、NOS、ER、PR激素水平(P<0.01或P<0.05),降低FSH、ACTH、CORT、β-EP、IL-1激素水平(P<0.01);主药对组明显提高E2、GnRH、NOS、ER、PR激素水平(P<0.01或P<0.05),降低FSH、ACTH、CORT、β-EP激素水平(P<0.01或P<0.05);无主药对组明显提高E2、P、LH、NO、GnRH、NOS、ER、PR激素水平(P<0.01或P<0.05),降低FSH、ACTH、CORT、β-EP、IL-1、CRH激素水平(P<0.01或P<0.05);疏肝组明显提高E2、P、GnRH、NOS、ER、PR激素水平(P<0.01或P<0.05),降低FSH、ACTH、CORT、β-EP、CRH激素水平(P<0.01或P<0.05);补肾组明显提高E2、P、LH、NO、GnRH、NOS、ER、PR激素水平(P<0.01或P<0.05),降低FSH、ACTH、CORT、CRH激素水平(P<0.01或P<0.05)。
　　正常状态下f1与β-EP、IL-1、CRH、E2、FSH、PR、GnRH有较强联系,与P、ER有一定联系,并且方差贡献率占39.899％;f2与NOS、ER、CORT、NO有较强联系,与E2、FSH、GnRH有一定联系,方差贡献率占20.815%;f3与ACTH、LH有较强联系,与NO、P有一定联系,方差贡献率占11.490%。
　　心理应激下f1与FSH、LH、ACTH、E2、P、PR、CORT、NOS有较强联系,与IL-1、NO有一定联系,并且方差贡献率占46.043%;f2与GnRH、CRH、β-EP、IL-1有较强联系,与E2、FSH、NOS有一定联系,方差贡献率占14.255%;f3与ER有较强联系,与CORT有一定联系,方差贡献率占10.546%;f4与NO有较强联系,方差贡献率占7.834%。
　　全方组干预下f1与P、E2、NO、FSH、LH、PR、NOS有较强联系,与IL-1、CORT有一定联系,并且方差贡献率占44.551%;f2与β-EP、GnRH、IL-1、CRH有较强联系,并且方差贡献率占19.512%;f3与ACTH、CORT有较强联系,与FSH、NOS、ER有一定联系,方差贡献率占8.622%。
　　主药对组干预下f1与LH、E2、FSH、P、PR、NOS有较强联系,与CORT、GnRH、ACTH有一定联系。并且方差贡献率占37.770%;f2与β-EP、IL-1、CRH有较强联系,并且方差贡献率占18.046%;f3与PR有较强联系,与FSH、ER、CORT有一定联系,方差贡献率占12.339%;f4与NO、GnRH有较强联系,与CORT、ACTH有一定联系。并且方差贡献率占6.916%。
　　无主药对组干预下f1与FSH、E2、P、LH、PR、NOS有较强联系,与NO、β-EP、IL-1有一定联系,并且方差贡献率占45.256%;f2与GnRH、CRH、β-EP、IL-1、ER有较强联系,与NOS有一定联系,并且方差贡献率占22.810%;f3与ACTH、CORT有较强联系,与PR、NOS有一定联系,方差贡献率占8.884%。
　　疏肝组干预下f1与LH、E2、FSH、P、NO有较强联系,与β-EP、CRH、IL-1、NOS、PR有一定联系,并且方差贡献率占47.811%;f2与GnRH、β-EP、CRH、IL-1有较强联系,并且方差贡献率占14.020%;f3与ACTH、NOS、CORT有较强联系,与FSH有一定联系,方差贡献率占9.528%;f4与ER、PR有较强联系,并且方差贡献率占7.562%。
　　补肾组干预下f1与NOS、E2、FSH、LH、P、PR有较强联系,与CORT、GnRH、IL-1、CRH有一定联系,并且方差贡献率占42.912%;f2与GnRH、β-EP、CRH、IL-1有较强联系,与FSH有一定联系,并且方差贡献率占16.153%;f3与NO有较强联系,与ER有一定联系,方差贡献率占9.634%;f4与ACTH有较强联系,与ER有一定联系,并且方差贡献率占7.457%。
　　结论:利用复合心理刺激法可以成功建立卵巢早衰大鼠模型。定经汤及其拆方能有效地提高E2、P、LH、NO、GnRH、NOS、ER、PR激素水平,降低FSH、ACTH、CORT、β-EP、IL-1、CRH激素水平。正常状态是下丘脑的生物分子对HPO轴的调控占主导作用;心理应激状态下,受激活HPA轴生物分子对HPO轴和下丘脑的影响占主导作用;定经汤全方组、主药对组和补肾组干预状态下,均是HPO轴的生物分子对下丘脑和HPA轴的调控占主导作用;定经汤无主药对组和疏肝组干预状态下,均是HPO轴的生物分子对下丘脑的调控占主导作用。

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前言

1 卵巢早衰简介

2 卵巢早衰的病因

3 卵巢早衰的治疗

4 卵巢早衰的动物模型

5 研究意义

第一部分 卵巢早衰动物模型的制作及评价

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

第二部分 定经汤及其拆方对卵巢早衰大鼠的药效研究

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

第三部分 基于因子分析的定经汤及其拆方调整卵巢早衰的生物学机制研究

1 因子分析法简介

2 方法

3 结果与讨论

4 小结

结论

参考文献

攻读学位期间发表的论文

英文缩略表

致谢