翡翠贻贝多糖的分离纯化、成分测定和保湿性研究

摘要

贝类提取的多糖、蛋白、糖蛋白和牛磺酸等具有抗氧化、抗肿瘤和提高免疫力等多种生物活性，如何更好地利用和拓展这些活性物质的作用，迫切需要对其分离纯化、结构功能技术以及应用性能开展深入的研究。本文旨在对四种常见的贝类(马氏珠母贝(Pinctada martensii)企鹅珍珠贝(pteria penguin)、近江牡蛎(Crassostrearivularis ovstetr)和翡翠贻贝(Perna viridis)的多糖的性能比较分析的基础上，重点选择翡翠贻贝多糖进行分离纯化、成分和功能测定以及在化妆品中的应用开展系统研究，以其达到提高贝类产品的功能价值，拓展对其深加工的新途径的目的。
　　以马氏珠母贝、企鹅珍珠贝、近江牡蛎和翡翠贻贝的内脏团为原料，采用热水浸提法提取纯化多糖，酶-sevage法除蛋白，在酶种选择试验中，四种贝类的最佳酶种有所不同，马氏珠母贝，企鹅珍珠贝和近江牡蛎的最佳酶种是枯草芽孢杆菌蛋白酶，经过酶-sevage法除蛋白的4种粗多糖，与甘油、聚乙二醇(PEG-400)、丙二醇和1，3-丁二醇等常规保湿剂的保湿性比较。结果显示：在相对湿度为44％时，前12h各种样品的吸湿率顺序为：马氏珠母贝<近江牡蛎<企鹅珍珠贝<翡翠贻贝　　在单因素试验中，分别考察温度、时间和液料比对多糖得率的影响，经实验验证，最佳的提取温度为90℃，时间为4h，液料比为20:1，因此在响应面分析中，分别以上述三个点作为中心点设计响应面。经响应面试验优化后的最优条件时间4.49h，温度为92.24，液料比为22.50。得率为19.82％，经验证后得率为19.79％，误差为0.03％，说明实验准确度较高，可以作为日后产业化的指导指标。
　　将分离的翡翠贻贝粗多糖PVPS(Perna viridis Polysaccharide)，经DEAE-cellulose52纤维素阴离子交换层析和sephadex G-100分子筛层析后，得到两个不同组分PVPS-2A和PVPS-2B。用紫外光谱扫描(UV)和聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳分别对这两个组分检测纯度，表明两种组分都已达到实验要求。采用傅里叶红外吸收光谱(FT-IR)和核磁共振波谱法(NMR)分析了多糖的构型，其构型为α-吡喃糖，PVPS-2A有可能是一种糖胺聚糖。采用气质联用(GC-MS)分析了单糖的组成和摩尔比。结果表明，PVPS-2A的单糖组成主要为木糖(30.77％)、甘露糖(11.40％)、葡萄糖(34.63％)和半乳糖(16.94％)，PVPS-2B的单糖组成主要为木糖(24.55％)、甘露糖(14.44％)、葡萄糖(33.52％)和半乳糖(20.84％)。
　　用经过分离纯化的翡翠贻贝多糖，由5％翡翠贻贝多糖、95％双蒸水和0.1％防腐剂贻贝多糖护肤化妆水，检测结果表明：翡翠贻贝多糖护肤化妆水符合化妆水QB/T2660-2004轻工行业标准的卫生标准和感官、理化指标。