腺相关病毒载体介导变异体DHFR和GFP融合基因入人外周血干/祖细胞的实验研究

摘要

目的:在以造血干细胞为靶细胞的基因治疗中,如何将外源基因导入静止状态的造血干细胞中是目前面临的最大障碍之一.人类造血干细胞中的二氢叶酸还原酶(DHFR)基因表达水平不足以对抗氨甲喋呤(MTX)引起的造血功能抑制.以腺相关病毒(AAV)为载体,将22和31位置双突变的DHFR(mDHFR)和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因导入引周血造血干细胞,达到保护机体造血功能的目的,同时建立了一个简便、易行的检测目的的基因的体系.结论:甘氨酸LINKER将两个不同的基因片段连接成功,腺相关病毒载体可将mDHFR-GFP融合基因成功导入外周血干祖细胞,转入的目的基因在靶细胞中可有效表达,产生相应有功能的物质(包括蛋白质),使经转染的外周血干祖细胞对MTX的耐药性增强,今后仍需进一步改善AAV结构、包装系统和基因转染技术,以提高基因转导效率.

目录

缩略名词注释

引言

实验材料

实验方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

附录1：文献综述

附录2：研究生在读期间论文发表情况

附图