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大肠癌线粒体氧化损伤及mtDNA突变的研究

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前言

第一部分大肠癌组织线粒体的氧化损伤检测

一、实验材料和方法

二、结果

三、讨论

第二部分大肠癌组织mtDNA突变检测

二、结果

(一)mtDNA的引物设计

(二)PCR扩增线粒体基因组DNA片段

(三)PCR产物纯化

(四)DNA测序循环反应及反应产物的纯化

(五)mtDNA突变检测

三、讨论

全文小结

参考文献

综述一自由基氧化致线粒体DNA损伤与大肠癌发生的研究进展

综述二 线粒体DNA与细胞癌变的最新研究进展

摘要:

1.mtDNA的结构和功能

2 .实体肿瘤中mtDNA的突变

3. mtDNA与细胞癌变

4 展望

参考文献

致谢

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摘要

该研究以人大肠癌组织的线粒体作为研究对象,观察线粒体的氧化性损伤和mtDNA突变,探讨其在大肠癌发生、发展中的作用.主要研究内容如下:1.用比色法检测自由基清除酶谱SOD、CAT、GSH—Px的活性和脂质过氧化水平MDA的含量,探讨大肠癌线粒体的抗氧化力作用;2.以罗丹明123(Rhodamine123,Rh123)作为荧光标记物,采用流式细胞术(Flow CytoMeter,FCM),检测线粒体膜电位的水平,探讨以线粒体作为抗癌药物靶点的机制.3.用高效液相色谱仪—电化学检测法检测mtDNA和nDNA中8-OH—dG的含量,探讨DNA的氧化损伤在大肠癌发生中的可能作用.4.自行设计mtDNA扩增引物,对PCR产物直接测序,检测大肠癌组织mtDNA突变情况,寻找大肠癌的mtDNA特异性突变.

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