跨膜4超家族成员9与滋养细胞侵袭相关性的研究

摘要

正常妊娠滋养细胞具有类似肿瘤细胞的侵袭性，但在胎盘形成后，滋养层细胞的侵袭行为便先行终止，这又与肿瘤细胞的侵袭完全不同，即所谓滋养层细胞侵入的节制性。滋养层细胞的侵入过程是受到机体严格的精细调控的，调节失控就会导致病变，其中滋养层细胞过度的侵入与多种妊娠滋养细胞疾病(如绒毛膜癌等)形成有关，而侵入不足则会造成自然流产、宫内发育迟缓、先兆子痫等。因此，阐明滋养层细胞的侵袭机制将为防治滋养层细胞侵入异常相关的疾病提供理论基础。 胚胎的滋养层细胞与子宫内膜细胞接触，启动粘附、迁移、基质降解、侵蚀母体血管及新生血管生成、侵袭子宫内膜等信号级联反应。如同肿瘤一样，滋养层细胞的转移能力也包括粘附、侵袭和迁移三个过程，影响其中的任一环节均有可能影响滋养层细胞侵入。 绒毛膜癌是继发于正常或异常妊娠之后的滋养细胞肿瘤，恶性程度极高，其危害主要在于转移发生早且广泛，严重影响了患者的生存率。如能早期提供有效、客观判断滋养细胞侵袭力的指标或标志物，则对临床工作有重大的指导四分子交联体超家族，又称跨膜4超家族(transmenberance 4 superfamilv，TM4SF)，是一组以四次跨膜及两个大小不等的细胞外环状结构为主要特征的膜表面蛋白，在哺乳动物体内广泛表达，除了红细胞外的所有类型的哺乳动物细胞均表达一种或几种四分子交联体。四分子交联体超家族成员还可以通过彼此间的相互联系，以及同许多其它类型的膜表面蛋白的联系，共同形成四分子交联体网(tetraspanin web)，调节细胞的运动、转移，激发同类型的细胞的聚集，多种类型细胞的融合，以及细胞的信号传导。越来越多的研究表明，这个家族的许多成员对恶性肿瘤的转移能力有重要影响。 TM4SF9是四分子交联体超家族的一员，它可以与多种生长促进分子和粘附分子结合，对恶性肿瘤的转移能力也有重要影响。目前对TM4SF9的研究，主要集中在神经系统，它在神经系统中高表达，可以影响小鼠的神经细胞及神经胶质细胞的粘附、运动和增殖。关于TM4SF9在滋养细胞中的表达及其作用，国内外尚未见报道。 为了解TM4SF9的表达是否与滋养细胞的侵袭相关，滋养细胞的侵袭力是否可以调控，本研究用免疫组化技术检测TM4SF9蛋白在正常早孕、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌中的表达，继而利用先进的RNAi技术阻断TM4SF9基因在绒癌JEG-3细胞中的表达，建立TM4SF9表达水平稳定下调的JEG-3细胞株，并观察绒癌JEG-3细胞侵袭行为的变化，试图从分子和细胞水平深入探讨该基因对滋养细胞疾病发病的影响，不仅有利于阐明滋养细胞疾病发病的分子机制，也希望为临床上诊断、治疗及预后判断寻找有效、客观的标志物，并探索滋养细胞疾病潜在的治疗靶点。

目录

声明

前言

第一章TM4SF9蛋白在早孕绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌中的表达及其意义

引言

第一节材料

第二节方法

第三节结果

第四节讨论

第五节小结

第二章稳定表达TM4SF9/shRNA的绒癌细胞株的建立与鉴定

引言

第一节材料

第二节方法

第三节结果

第四节讨论

第五节小结

第三章TM4SF9表达水平对绒癌细胞株转移相关生物学行为的影响

第一节材料

第二节方法

第三节结果

第四节讨论

第五节小结

全文小结

参考文献

附录

成果

致谢