中医大肠湿热证模型研制及葛根芩连汤对其影响的研究

摘要

目的：研究大肠湿热证动物模型的造模方法，检测大肠湿热证模型鼠血清白介素(Interleukin，IL)-1，-2，-6含量的变化及血清和粪便的轮状病毒抗原，光、电镜观察模型鼠大肠组织病理变化及超微结构改变，应用清热祛湿方药葛根芩连汤反佐治疗，探讨大肠湿热证模型的部分客观化指标。 方法：以清洁级Wistar大鼠及BLAB/C幼鼠为实验动物，设立大肠杆菌模型组(Ⅰ组)、轮状病毒模型组(Ⅱ组)、大肠杆菌+轮状病毒模型组(Ⅲ组)、幼鼠轮状病毒模型组(Ⅳ组)、正常对照组、葛根芩连汤治疗组(治疗Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅴ组)、治疗对照组(Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅵ组)，葛根芩连汤治疗组和治疗对照组生物因素编排分别对应模型组的Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。应用高糖高脂饲料、高温高湿环境、轮状病毒及产毒性大肠杆菌灌胃，综合制作大肠湿热证动物模型，给予清热祛湿方药葛根芩连汤反佐验证治疗，应用放射免疫法检测鼠血清IL-1、IL-2、IL-6含量，ELISA法检测血及粪便中的轮状病毒抗原，HE染色法观察结肠、回肠病理改变，透射电镜观察超微病理变化。 结果：大肠湿热证模型鼠出现发热、食欲不振、肛门红肿充血、便溏、嗜卧、行动呆滞、毛发蓬松、饮水少等，该模型无论从发病条件、病变部位，还是主要症状、体征等均近似于中医大肠湿热证型。各造模方法中模型鼠血清IL-1、IL-2含量比正常对照组显著升高(P<0.001)，而IL-6组间无显著性差别(P=0．053)，EuSA法可检测到血清及粪便中的轮状病毒抗原，结肠、回肠组织HE染色见黏膜充血、水肿、渗出、淋巴组织增生、大量炎症细胞浸润；电镜下可见大量杆菌吞噬体及病毒包涵体。葛根芩连汤治疗鼠症状消失，血清IL-1、IL-2、IL-6含量接近正常，血清及粪便中的轮状病毒抗原转阴，光、电镜显示肠道炎症反应明显减轻。 结论：(1)在高糖高脂饲料喂养、轮状病毒及大肠杆菌灌胃的基础上，我们首次采用全封闭式高温仓，自动调节温度、湿度，成功研制了大肠湿热证动物模型，体现了中医大肠湿热证脾胃内伤，再感客邪的“内外合邪”致病特点； (2)大肠湿热证模型鼠血清IL-1、IL-2含量明显升高(与正常对照组比较P<0.001)，而血清IL-6升高不显著(P>0.05)，表明大肠湿热证模型鼠出现炎症反应，结肠、回肠的光、电镜检查结果证实模型鼠结肠、回肠出现广泛的炎症反应； (3)运用葛根芩连汤对模型大鼠进行反佐验证治疗后大肠湿热证症状消失，血清IL-1、IL-2、IL-6含量恢复正常，血及粪便中轮状病毒抗原转阴，光、电镜观察肠道炎症改变明显减轻甚至消失，也证明了模型为中医大肠湿热证模型。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

前言

第一部分 中医大肠湿热证模型研制

一、材料与方法

二、结果

（一）、大肠湿热证大肠杆菌模型研制(模型I组)

（二）、大肠湿热证轮状病毒模型组(模型Ⅱ组)

（三）、大肠杆菌加轮状病毒混合模型组(模型Ⅲ组)

（四）、幼鼠轮状病毒模型组(模型Ⅳ组)

（五）、各组实验鼠体温的比较

（六）、各模型组实验鼠血清IL-1，IL-2和IL-6的比较

三、讨论

第二部分 葛根芩连汤对中医大肠湿热证模型的影响

一、材料与方法(造模方法同第一部分)

二、结果

（一）、葛根芩连汤对大肠杆菌模型组（模型I组）的影响

（二）、葛根芩连汤对轮状病毒模型组（模型II组）的影响

（三）、葛根芩连汤对大肠杆菌加轮状病毒模型（模型III组）的影响

三、讨论

全文小结

参考文献

附图

附录

成果

致谢