日本血吸虫童虫差异表达蛋白质组研究和童虫差异表达基因SjEnol的克隆和表达

摘要

本研究应用双向电泳技术对日本血吸虫(中国大陆株)童虫(16日龄)和成虫(雌、雄虫，40日龄)虫体可溶性蛋白进行了分离，应用image-master软件分析童虫、雌虫和雄虫的双向电泳图谱，显示两个不同发育时期虫体在可溶性蛋白组分上分别分离到2000±69、1100±75和1310±18个蛋白斑点，这些蛋白斑点大部分在Mr10～80KD、pI3～8的电泳图谱区域，其中童虫蛋白电泳图谱中呈现26±2个不同于成虫的特异表达蛋白斑点。　　从童虫期差异表达的蛋白斑点中选取10个对比性最强的蛋白斑点进行质谱鉴定，结果成功地获得了其中5个蛋白斑点的肽指纹图谱检测数据，进一步通过MASCOT、ProFound和Scope等软件查询数据库对目标蛋白进行鉴定。结果表明这些差异表达蛋白主要参与蛋白信号转导、能量代谢、转录、翻译调控和作为细胞构架蛋白等。　　基于日本血吸虫期别差异表达蛋白质组的研究分析结果，选择一个童虫差异表达的蛋白分子进行深入研究，通过质谱(ESI)分析鉴定得到该蛋白质的部分氨基酸序列，利用RACE、PCR技术克隆出该目的蛋白编码基因，其ORF的核苷酸序列有1305bp，推测编码434个氨基酸，同源分析表明该蛋白为日本血吸虫烯醇酶(SjEnol)。

目录

文摘

英文文摘

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引言

第一章血吸虫病的基本概况

1.1血吸虫生物学

1.2血吸虫病的流行、治疗及疫苗的研究进展

第二章血吸虫期别差异表达蛋白的研究

2.1蛋白质组学

2.2血吸虫蛋白质组的研究

第一章日本血吸虫童虫差异表达蛋白质组的研究

摘要

前言

1.实验材料

2. 方法

3.结果

讨论

第二章日本血吸虫童虫期差异表达蛋白烯醇酶编码基因的克隆、表达及功能分析

摘要

1. 实验材料

2. 实验方法

3.结果

讨论

附图

结论

参考文献

致谢

附录

作者简历