鸡组织中沙咪珠利残留标示物超高效液相色谱检测方法的建立及其消除规律研究

摘要

沙咪珠利是由中国农业科学院上海兽医研究所兽用抗感染药物创新团队自主研发的一种新型三嗪类抗球虫药，该化合物抗虫谱广，毒性低，且前期药效学研究表明，具有高效的抗球虫的活性，有望成为一种新的抗球虫药，广泛应用于养殖业。沙咪珠利在机体内主要被代谢为6种代谢产物。其中代谢物M3在肾脏组织中残留时间最长，残留量最多。而其他组织中以原药残留量较多，故考虑将沙咪珠利及其主要代谢物M3共同作为残留标示物，来研究其在鸡组织中的残留检测方法及残留消除规律。旨在为新药上市提供可靠的理论依据，确保动物性食品的安全。
　　鸡组织样品经乙腈和10％碳酸钠溶液提取，正己烷除脂，Oasis MCX固相萃取小柱净化，5％氨化甲醇洗脱，洗脱液60℃水浴氮吹浓缩，用流动相复溶，离心，过滤膜，用UPLC-UV检测。沙咪珠利在10～2000μg/kg组织样品添加的范围内线性关系良好，R2大于0.99，代谢物M3在50～8000μg/kg组织样品添加的范围内线性关系良好，R2大于0.99。沙咪珠利在肌肉、皮脂、肝脏中的检测限分别为3、3、10μg/kg，定量限分别为10、20、50μg/kg，代谢物M3在肌肉、皮脂、肝脏、肾脏中的检测限分别为25、25、50、50μg/kg，定量限为50、100、250、250μg/kg。组织中添加的平均回收率在87.3～103.2％范围内，日内变异系数均小于9.1％，日间变异系数均小于15.5％。
　　沙咪珠利的临床推荐剂量为10mg/L饮水。将其饮水制剂配制成推荐剂量的饮水，连续3天不间断给鸡喂水，并于停药后的第0.5h、4h、8h、12h、24h、72h、96h、120h、6d、7d、8d、10d、14d各宰杀6只鸡，研究沙咪珠利在鸡肉、皮脂、肝脏、肾脏组织中的残留消除情况，并利用WT1.4软件进行休药期的计算。利用已建立的鸡组织中沙咪珠利及主要代谢物M3的UPLC检测方法测定。检测结果表明，沙咪珠利及其代谢物M3在肾脏中残留量最多，肝脏、皮脂次之，肌肉中残留量最少。停药后96h，各组织中沙咪珠利及其代谢物M3的残留量已降到各自定量限以下，第5天已检测不到残留物。根据软件计算结果，临床推荐给药剂量下，沙咪珠利饮水制剂在鸡体内的休药期为4天。

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摘要

英文缩略表

第一章 引言

1．1 鸡球虫病及防治概述

1．2 抗球虫药物研究进展

1．2．1 聚醚类离子载体抗生素

1．2．2 化学合成类药物

1．2．3 中草药

1．2．4 抗球虫药物存在的问题

1．3 三嗪类抗球虫药残留检测进展

1．3．1 样品前处理

1．3．2 测定方法

1．4 本论文研究的目的意义

1．5 本论文研究的内容

第二章 鸡肉、皮脂、肝脏、肾脏组织中沙咪珠利及其代谢物M3残留检测方法的建立

2．1 引言

2．2 材料

2．2．1 药品及试剂

2．2．2 仪器及其他

2．3 方法

2．3．1 样品采集

2．3．2 标准溶液配制

2．3．3 色谱条件

2．3．4 样品前处理

2．3．5 方法学考察

2．4 结果与讨论

2．4．1 残留标示物

2．4．2 内标化合物

2．4．3 色谱条件的优化

2．4．4 样品前处理的摸索

2．4．5 方法学考察结果

2．5 本章小结

3．1 前言

3．2 材料

3．2．1 药品及试剂

3．2．2 仪器及其他

3．2．3 实验动物

3．3 方法

3．3．1 给药方案

3．3．2 样品采集

3．3．3 样品测定

3．4 结果与讨论

3．5 本章小结

第四章 全文结论

参考文献

致谢

作者简历